[实用新型]卡那霉素ELISA检测试剂盒

说明书

(一)技术领域：本实用新型涉及卡那霉素残留量的酶联免疫试剂盒，特别是检测肌肉、肝脏中卡那霉素残留量的酶联免疫检测(ELISA)试剂盒，ELISA(Enzyme Linked Immunosorbnent Assay)是酶联免疫吸附剂测定的简称，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术。

(二)背景技术：卡那霉素是氨基糖甙类抗生素，被广范应用于动物疾病的治疗，由于其具有神经毒性和肾脏毒性，在动物食品中的残留会影响人类健康，欧美国家及我国均要求其限量使用。

卡那霉素残留量的常规检测方法主要有高效液相色谱(HPLC)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)等，由于复杂的仪器设备和繁琐的过程以及对检验人员的高技能要求，不适合现场监控和大量样本的筛查。

(三)实用新型内容：本实用新型所要解决的问题是提供一种小巧轻便的卡那霉素残留量检测试剂盒，其操作简便，检测快速、准确、灵敏度高，成本低，稳定性好，需要的技术含量不高，可进行一次连续多个样品中卡那霉素残留量的测定，减少了检测样本所需要的时间。

本实用新型的技术方案是：一种卡那霉素检测试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔的酶标板、一张盖板膜、14瓶试剂和放试剂的下凹瓶位、一个自封袋、一份说明书和一份质检报告，其特征在于：酶标板是采用96孔试剂板作为固相载体，在试剂盒微孔条上预包被卡那霉素偶联抗原制成的检测板，14瓶试剂分别7瓶标准品溶液、酶标二抗工作液、抗体工作液、显色液A液、显色液B液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液，下凹瓶位共15个。

盒体是硬纸盒；96孔的聚苯乙烯酶标板，放于真空铝箔袋内；盖板膜是塑料硬膜；标准品溶液均用黑色帽的半透明PE塑料瓶，酶标二抗工作液用红色帽的白色PE塑料瓶，抗体工作液用绿色帽的白色PE塑料瓶，显色液A液用白色帽的白色PE塑料瓶，显色液B液用红色帽的黑色PE塑料瓶，终止液用黄色帽的白色PE塑料瓶，浓缩洗涤液用透明帽的半透明PE塑料瓶，浓缩复溶液用蓝 色帽的半透明PE塑料瓶，下凹瓶位由塑料泡沫制成。

酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔，每个反应孔预包被卡那霉素偶联抗原；盖板膜大小与酶标板横切面大小一致；标准品溶液7瓶，1ml/瓶；酶标二抗工作液1瓶，7ml；抗体工作液1瓶，10ml；显色液A液1瓶，7ml；显色液B液1瓶，7ml；终止液1瓶，7ml；浓缩洗涤液1瓶，40ml；浓缩复溶液1瓶，50ml。

将14瓶试剂用不同大小、不同颜色的塑料瓶盛装并固定在下凹瓶位中与酶标板、盖板膜、自封袋、说明书、质控报告一同封装在硬纸盒内，以便于携带和运输。每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可进行一次连续多个样品的检测，也可以将板孔拆开多次检测。将剩下的放回铝箔袋中用自封袋密封，这样可以保证试剂盒检测结果的准确性。检测时，样本中的卡那霉素将和酶标板微孔条上预包被的卡那霉素偶联抗原竞争抗卡那霉素抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光度值与样本中所含卡那霉素的残留量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中卡那霉素残留量，其操作简便易行。

经实验表明本试剂盒具有很高的灵敏度：肌肉、肝脏样本的最低检测限为10μg/kg，回收率范围均在75％～105％之间；相对于其他卡那霉素检测方法，本试剂盒所需仪器较少，只需要酶标仪、离心机、振荡机、涡旋仪、恒温水浴箱和微量加样器等，同类实验室一般均有配备，所需成本较低。

本实用新型的有益效果是：能快速、简便、灵敏、准确地用于卡那霉素残留量的检测。

(四)附图说明：

图1为本实用新型酶联板的侧面纵剖面图(长为8.55cm)；

图2为本实用新型酶联板的侧面横剖面图(长为12.8cm)；

图3为本实用新型酶联板的俯视图；

图4为本实用新型盖板膜平面图；

图5a为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图5b为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图5c为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图5d为本实用新型试剂瓶纵剖面平面图；

图6为本实用新型固定泡沫模具的俯视图；

图7为本实用新型盒体与固定泡沫模具的侧视图。