[实用新型]用于转基因拟南芥种苗原位筛培的装置无效
| 申请号: | 201020261076.7 | 申请日: | 2010-07-15 |
| 公开(公告)号: | CN201733690U | 公开(公告)日: | 2011-02-09 |
| 发明(设计)人: | 许卫锋;施卫明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南京土壤研究所 |
| 主分类号: | A01G31/02 | 分类号: | A01G31/02 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 唐建清 |
| 地址: | 210008 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 转基因 拟南芥 种苗 原位 装置 | ||
一、技术领域
本实用新型属于转基因拟南芥的培育技术领域,特别涉及一种用于转基因拟南芥种苗原位筛培的装置。
二、背景技术
拟南芥为植物科学研究的模式植物,将外源基因过量表达在拟南芥体内,已成为人们研究基因功能的基本手段之一。蘸花法是获得转基因拟南芥的简便方法之一,它不需要通过组织培养的手段非常方便地获得转基因拟南芥T1代种子(Weigel D,Glazebrook J.2002.Arabidopsis:A laboratory manual.Cold Spring Harbor Laboratory Press,New York.)。然而该方法筛选转基因拟南芥T2代种子非常繁琐,主要有如下缺点:1)T2代种子必须在无菌条件下的卡那霉素生长板上进行筛选。这一步对无菌操作要求较高,万一不小心污染了卡那霉素生长板,整个生长板拟南芥幼苗都不能使用。2)T2代种子在卡那霉素生长板生长7天后,一般都要将抗性苗移栽到蛭石为生长介质生长杯中,有一部分苗会在移栽这一步丢失。同时,这一步也会使幼苗需要较长的适应时间。因此,有必要提供一种筛选和培养转基因拟南芥T2代种子的新装置。
三、实用新型内容
发明目的:针对上述技术缺陷,本实用新型提供一种用于转基因拟南芥种苗原位筛培的装置,提高了转基因拟南芥种苗的培育效率,利用该装置的筛选体系移动方便、便于操作、容易建立,且设备构建的成本低,尤其对筛培转基因拟南芥T2代种子的更为方便。
技术方案:用于转基因拟南芥种苗原位筛培的装置,包括培养箱盖板和箱体,所述培养箱盖板上设有培养孔阵列,培养孔内设有种苗管;所述箱体的侧壁上设有遮光板,遮光板与箱体活动连接。
上述装置还包括增氧泵和pH调节装置,增氧泵与pH调节装置分别与箱体连接。
上述培养箱盖板表面的相邻两条边上根据孔的位置设有坐标刻度。
上述箱体的侧壁由透光材料和不透光材料上下拼接而成,箱体四周透光材料侧壁的上下沿设有滑槽,遮光板在滑槽内滑动,透光材料侧壁上设有刻度用以测量根系生长长度;不透光材料侧壁上设有增氧泵接口和pH调节装置接口。
上述种苗管为漏斗结构,高10mm,上底面直径9mm,下底面直径5mm。
上述盛放营养液的容器尺寸为30×20×20cm。
有益效果:与传统装置和方法相比,新的装置可以实现原位筛选,装置与增氧泵和pH调节装置联用,组成了完整的培养系统,可以根据所培养的植物生长要求实时调节培养条件,培养箱盖板上设有的坐标系可以方便实验者记录实验细节,准确定位每个培养箱盖板上的种苗,箱体由两种透光性能的材料组成,需要与箱体连接的设备均可以通过下层的不透光材料进行连接,避免了接口处漏光对植物生长造成的不良影响,透光材料部分可以方便实验者观察植物根系的生长,从而判断植物的长势,透光材料部分还附加有遮光板,遮光板有自己独立滑槽,当实验人员观察完毕后,可以还原根系生长所需的黑暗环境,尽可能少的减少光对植物的影响。
四、附图说明
图1原位筛培装置;图中培养箱盖板1、箱体2、培养孔3、种苗管4、透光材料5、不透光材料6、滑槽7、遮光板8、刻度9、增氧泵接口10、pH调节装置接口11;
图2用原位筛培装置筛选的30天苗龄拟南芥抗性苗体内At-L23a基因的表达;At-L23a基因的表达结果表明Real-time RT-PCR的试验体系可靠、准确;【用原位筛培装置获得的30天苗龄拟南芥抗性苗体内At-L23a基因的表达。REU(相对表达单位),为At-L23a基因的拷贝数与看家基因At-ACT2拷贝数的比值再乘以100所得的数值。】
图3用原位筛培装置筛选的30天苗龄拟南芥抗性苗体内TFT7基因的表达;TFT7基因(番茄的14-3-3基因)的表达结果表明,9株拟南芥抗性苗都含有转化的外源基因,都为阳性;【用原位筛培装置获得的30天苗龄拟南芥抗性苗体内TFT7基因的表达。REU(相对表达单位),为TFT7基因的拷贝数与看家基因At-ACT2拷贝数的比值再乘以100所得的数值。】
五、具体实施方式
下面结合具体实例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于对本发明进行说明,并不构成对权利要求范围的限制,本领域技术人员可以想到的其他替代手段,均在本发明权利要求范围内。
实施例1:
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