[实用新型]一种紫杉醇产生菌发酵红豆杉枝叶生产紫杉醇新方法

权利要求书

1.本发明涉及一种产紫杉醇新菌种，其特征是：所述的新菌种为从本地野生南方红豆杉树皮中分离筛选的菌株，该菌株于2007年委托中国微生物菌种保藏中心(CGMCC)作专利保存。

2.根据权利要求1所述的产紫杉醇新菌种发酵红豆杉枝叶生产紫杉醇方法，其特征是：

(1)菌株发酵培养基采用液体MS培养基；

(2)红豆杉枝叶处理：红豆杉新鲜枝叶经过125℃蒸汽处理1min左右，温度冷却至室温后，平铺于通风发酵池的发酵床上。

(3)发酵培养：取活化的斜面菌种，接种于液体MS培养基中，每只摇瓶接1环，在摇床上150r/min，25℃培养72h左右，作为种子液，按5％比例接入发酵罐进行发酵，1.8L/min的通气量25℃培养72h左右，用4倍于发酵液体积的液体基本MS培养基稀释，作为紫杉醇生产用接种菌液，均匀喷洒于处理好的红豆杉枝叶上，22℃±3℃条件下通风发酵120h完成发酵过程。

(4)紫杉醇的提取：将发酵后的红豆杉枝叶，机械打碎成浆，加入3倍于浆状物体积的95％乙醇，搅拌均匀，静置后分层，倾出上清液，沉淀层采用板框压滤机压滤，滤液与倾出的上清液合并后离心除去杂质，进行低温真空干燥，获得膏状紫杉醇粗品，回收乙醇可循环使用。