[发明专利]一种利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法

权利要求书

1.一种利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法，其特征在于，使用兼性厌氧菌为肠杆菌科(Enterobacteriaceae)肠杆菌属(Enterobacter)的产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes)CICC10293，以蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、水的混合液为培养基，以葡萄糖为发酵底物，采用分批发酵的方法，制备得到氢气，其中，所述的培养基中蛋白胨的浓度为4～6g/L，牛肉膏为2～4g/L，NaCl为4～6g/L。

2.根据权利要求1所述利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法，其特征在于，具体方法为：无菌操作下，配制培养基并灭菌，将产气肠杆菌的高浓缩菌液以2％～5％体积比例接种于培养基，所述的高浓缩菌液的菌液浓度为5×10⁹～5×10¹¹cell/mL，在温度为20～50℃、维持pH在5～8，170r/min的摇床振荡培养24～48h后，将得到的培养好的菌液转移到已灭菌的浓度为5～60g/L葡萄糖发酵底物中，封闭后继续在温度20～50℃、转速170r/min摇床振荡培养，并连接氢气收集装置收集氢气。

3.根据权利要求2所述利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法，其特征在于，无菌操作下，按照5～60g/L比例向培养基中添加葡萄糖发酵底物，灭菌后得到培养发酵基，将产气肠杆菌的高浓缩菌液以2％～5％体积比例接种至培养发酵基，封闭后于温度为20～50℃、pH在5～8的范围内，170r/min的摇床振荡培养，并连氢气接收集装置氢气。

4.根据权利要求1～3任一所述利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法，其特征在于，在培养基中添加K₂HPO₄1～1.5g/L，FeSO₄·4H₂O 0.1～0.2g/L。

5.根据权利要求4所述利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法，其特征在于，pH在6～7。

6.根据权利要求5所述利用兼性厌氧菌发酵制氢的方法，其特征在于，所述的发酵培养基中各成分的浓度为：蛋白胨5g/L，牛肉膏3g/L，NaCl 5g/L，K₂HPO₄ 1.5g/L，FeSO₄·4H₂O 0.2g/L；葡萄糖底物浓度为20g/L；在pH为6.0～7.0、温度为40℃条件下采用分批发酵的方式进行恒温振荡培养，振荡频率为170r/min，培养时间20h。