[发明专利]甲型肝炎病毒株SH及其二倍体细胞适应方法有效
申请号: | 201010622258.7 | 申请日: | 2010-12-28 |
公开(公告)号: | CN102174477A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 张现臣;魏文进;黄秋香;钟汉斌;孟红彦;王春雨 | 申请(专利权)人: | 深圳康泰生物制品股份有限公司;北京民海生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12N7/08;A61K39/29;A61P31/14;A61P1/16;C12R1/93 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 518057 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肝炎 病毒 sh 及其 二倍 体细胞 适应 方法 | ||
1.甲型肝炎病毒SH株,其保藏号为CGMCC NO.4501。
2.权利要求1所述的甲型肝炎病毒SH株在二倍体细胞上适应的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将MRC-5细胞经常规方法培养,细胞长成单层后接种甲型肝炎病毒株SH悬液,40cm2培养瓶种1ml病毒液,37℃吸附2小时,加维持液,35℃培养,每间隔7天更换病毒维持液一次,培养35天,用PBS洗细胞面3次,再用胰酶消化细胞,按0.01ml/cm2培养面积加入MEM悬浮沉淀细胞,得到病毒细胞悬液,超声破碎细胞,制备成病毒悬液;
2)以步骤1)的方法,连续在MRC-5细胞上传15~22代;
其中,所述MEM为0.03%Glu、0.08%NaHCO3、0.01%青霉素和0.01%链霉素;所述维持液为MEM加2%小牛血清。
3.权利要求1所述的病毒株、权利要求2所述经传代后的病毒在制备用于预防、治疗甲型肝炎的疫苗、药物中的应用。
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