[发明专利]返魂草浸膏的质量检测方法

权利要求书

1.返魂草浸膏HPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸、咖啡酸对照品，分别加入甲醇制成每1ml含12-16μg的溶液；

(2)供试品溶液的制备：取返魂草，加水9-11倍量煎煮2-3次，每次1-2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.4-0.6g，置于50ml容量瓶中，加甲醇35-45ml，超声处理30-60分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(3)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为7-9∶91-93的混合溶液；紫外检测波长为327nm；流速为1.0ml/min；

(4)测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到返魂草浸膏指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的方法，所述对照品的浓度为每1ml甲醇含15μg对照品。

3.根据权利要求1所述的方法，所述供试品溶液的制备步骤如下：取返魂草，加水10倍量煎煮3次，第1次煎煮2h，第2、3次每次煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩成浸膏、干燥；取所得浸膏0.5g，置于50ml容量瓶中，加甲醇40ml，超声处理45分钟，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

4.根据权利要求1所述的方法，所述流动相为乙腈-0.4％磷酸溶液为8∶92的混合溶液。

5.返魂草浸膏的HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，按照权利要求1-4任一项所述的方法构建12批返魂草浸膏HPLC指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件生成由6个共有峰构成的返魂草浸膏HPLC标准指纹图谱，所述共有峰中第5号峰为绿原酸峰，第6号峰为咖啡酸峰。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述标准指纹图谱中，以绿原酸峰为参照峰S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在第一规定值的±5％之内，所述第一规定值分别为：0.12-峰1、0.16-峰2、0.24-峰3、0.49-峰4、1.00-峰S、1.27-峰6；所述共有峰的峰面积在第二规定值±20％之内，采用面积归一化法计算，第二规定值分别为：9.91％-峰1、3.32％-峰2、3.27％-峰3、18.99％-峰4、36.28％-峰S、28.21％-峰6。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述6个共有峰的保留时间分别为2.54、3.19、4.95、9.98、20.51、26.01，峰面积分别为152999、59692、72272、322837、495408、385225。

8.返魂草浸膏的质量检测方法，其特征在于，取返魂草浸膏样品，按权利要求1-4任一项同法操作，得到返魂草浸膏样品指纹图谱，采用中药色谱指纹图谱相似性评价系统软件对所述样品指纹图谱和权利要求5-7任一项所述的返魂草浸膏的标准指纹图谱进行分析，相似度大于0.95为合格产品。