[发明专利]一种硫酸软骨素的提取方法

说明书

技术领域

本发明方法涉及猪软骨深加工技术领域，具体涉及一种硫酸软骨素的提取方法，是一种以猪鼻软骨为原料，通过生物酶解技术，从而提取硫酸软骨素的方法。

背景技术

硫酸软骨素是从动物组织中提取制备的酸性粘多糖，是糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β-1，4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在N-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羟基上发生硫酸酯化。硫酸软骨素对角膜胶原纤维具有保护作用，能促进基质中纤维的增长，增强通透性，改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗透液的吸收及炎症的消除；其聚阴离子具有强的保水性，能改善眼角膜组织的水分代谢，对角膜有较强的亲和力，能在角膜表面形成一层透气保水膜，促进角膜创伤的愈合及改善眼部干燥症状。此外，它为关节疼痛患者带来福音，主要表现在一方面提供垫衬作用，缓和行动时的冲击和摩擦，另一方面把重要的氧供和营养素输送至关节，帮助清除关节内的废物。

目前，国内外提取硫酸软骨素普遍采用稀碱或浓碱与酶解相结合的方法。稀碱酶解工艺中，稀碱溶液用量大，使在酒精沉淀时，用量更大；浓碱酶解工艺中，碱用量大，为后面的提纯带来困难。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种硫酸软骨素的提取方法，是一种以提高产品纯度、节能和提高产品安全性为目的的提取方法，该方法有利于工业化的生产。

为了实现上述技术目的，本发明的一种硫酸软骨素的提取方法的步骤如下：

1、称取市售猪鼻软骨作为原料，剪去结缔组织，洗净后加水煮沸，除去油脂，然后将除去油脂后的猪鼻软骨从水中捞出，用绞肉机绞碎，加入原料猪鼻软骨3倍重量的水，调pH值至8.5-9.0，升温至45-50℃，加入占原料猪软骨重量2％的牛胰蛋白酶(酶活力为3.3万U/g)，在45-50℃下搅拌酶解4-5h，酶解过程中保持反应体系的pH值稳定在8.5-9.0；

2、将酶解液调pH值至6.8-7.0，依次加入原料猪鼻软骨重量1％的白陶土、1％的活性炭粉末，45℃搅拌吸附1h，然后过滤除去白陶土和活性炭，得滤液；

3、将滤液的pH值调至6.0，然后加入其三倍体积的95wt％乙醇，充分搅拌后静置，去上清液，得沉淀，即为硫酸软骨素粗品；

4、加入9倍粗品重量的纯水将粗品溶解，再依次加入粗品重量1％的氯化钠，1％的牛胰蛋白酶(酶活力为3.3万U/g)，45-50℃下搅拌酶解3-4h，酶解过程中控制反应体系的pH值稳定在8.5-9.0，然后升温至90-95℃，保持10-15min以灭酶，然后过滤得过滤液；

5、调节过滤液的pH值至2.0-3.0，然后用滤膜孔径为5nm的过滤机过滤，以除去无机盐和小分子杂质；

6、调节所得滤液的pH值至6.5，记下此时的溶液体积，然后加入此体积2倍的90wt％乙醇进行沉淀，分离出沉淀后，加入与沉淀等体积的无水乙醇脱水，最后真空干燥得硫酸软骨素精品。

本发明方法中用于调节pH值的酸和碱分别是35～37wt％的盐酸和固体氢氧化钠。

与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果如下：

1、采用白陶土和活性炭脱色，既避免了有害物质在产品中的残留，又能保证产品的天然洁白度，所得产品为白色均匀粉末；

2、采用本发明的纳滤技术，对液态物料进行分离、浓缩和纯化，均在常温下操作、无相态变化、高效节能，并且生产过程中不产生污染；

3、本法所得产品的纯度高，不产生任何有毒有害物质，安全，无毒副作用，可广泛用于药品、保健品等领域。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明方法做进一步的详细说明。

以下实施例中用于调节pH值的酸和碱分别是35～37wt％的盐酸和固体氢氧化钠。

实施例1：

一种硫酸软骨素的提取方法，其步骤如下：

1、称取市售猪鼻软骨1kg，剪去结缔组织，洗净后加水煮沸，除去油脂，然后将除去油脂后的猪鼻软骨从水中捞出，用绞肉机绞碎，加入3kg纯水，调pH值至8.5，升温至45℃，加入20g牛胰蛋白酶(酶活力为3.3万U/g)，在45℃下搅拌酶解4h，酶解过程中保持反应体系的pH值稳定在8.5；

2、将酶解液调pH值至6.8，依次加入10g白陶土、10g活性炭粉末，45℃搅拌吸附1h，然后过滤除去白陶土和活性炭，得滤液；

3、将滤液的pH值调至6.0，然后加入其三倍体积的95wt％乙醇，充分搅拌后静置，去上清液，得沉淀400g，即为硫酸软骨素粗品；