[发明专利]一种肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂

说明书

技术领域

本发明涉及生物药物学领域，更具体地讲，本发明涉及一种针对肿瘤化学治疗的新型增效物质。

背景技术

多年来经过对肿瘤不懈努力的研究，人们发现肿瘤细胞产生的耐药性是治疗肿瘤的主要绊脚石。统计表明，肿瘤年死亡率中，约90%以上的肿瘤患者死因都与耐药有关。化学药物在杀死肿瘤细胞的同时，也存在细胞毒性，损害正常组织器官，降低机体免疫功能等毒副反应，影响化疗效果，甚至被迫放弃化疗。

目前，为了改善化疗和放疗效果，研究主要集中在逆转药物或增敏药物上，希望通过耐药的发生机制，寻找可能应用于临床的肿瘤多药耐药逆转药物，以期对肿瘤的有效治疗取得重大突破。现在，人们已经从基因分子水平研究了若干耐药的产生机制，尽管目前发现的癌症治疗的潜在靶标不少，但是我们只知道部分在癌症异常表达的一些分子及其维持癌症的复杂的途径交叉，例如：生存素（Survivin）就是目前肿瘤治疗靶标的典型代表，在各种癌症中特异性高表达，而在成人终末分化组织中一般不表达或低表达。Survivin参与细胞凋亡的抑制、细胞周期的调控、血管的再生，同时还参与多个途径中的调节、转录和修饰基因直接或间接相互作用，参与肿瘤细胞的耐药机制，是一个重要的节点蛋白。

生物类药物由于其特异性、低毒、以其对肿瘤耐药机制的有效干扰，而成为有效解决肿瘤多药耐药性的新的希望。

公开号CN 1710080A利用质粒构建并重组腺病毒，蛋白质序列53位氨基酸D突变为A，证明该发明可以在多个细胞中强烈诱导细胞凋亡；公开号CN 1869042A利用靶向survivin基因的siRNA阻断肿瘤细胞内正常survivin的表达，产生对肿瘤细胞促凋亡能力。以上专利均属于核酸水平抑制survivin正常功能，在机体内稳定性低，容易被降解，分子水平有可能产生非特异性沉默及脱靶现象，因此我们需要转染率高、易生产、稳定性高、风险性低，治疗效果强的基因重组药物克服目前肿瘤治疗过程中的瓶颈。

作为本发明的前期研究，中国专利：200510026847.8（授权公告号：CN 100424096C）公开了生存素Survivin突变体及其制备方法和初步功能，揭示Survivin突变体融合蛋白TmSm对癌细胞有明显的促凋亡作用，但并没有涉及其与肿瘤化疗药物联合使用时的效果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够有效促进肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用、降低化学药物使用剂量，因此具有化疗增敏效果的基因工程蛋白增敏剂。

本发明的第二个目的是提供肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂在促进肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用中的应用。

为实现以上目的，本发明公开以下技术方案：一种肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂，所述蛋白增敏剂包括Survivin突变体蛋白（本发明中简称TmSm），所述Survivin突变体蛋白通过基因工程制备，与survivin具有90%的同源性，所述Survivin突变体蛋白包括20位、34位、84位、117位位点单点突变、多点突变、组合突变，以及以上位点同时突变。 

所述Survivin突变体蛋白优选第34位突变，本发明中第34位突变体代号为TATm-Survivin(T34A)。

所述蛋白增敏剂包括药学允许的载体系统，所述载体系统指TATm、TAT33m或者碳纳米管。TATm、TAT33m都是指转导蛋白TAT的不同突变形式，他们分别具有与天然TAT有5倍和33倍的转导效果, 碳纳米管是目前用于转导药物的一种常用碳纳米材料。

所述肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂在促进肿瘤化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用中的应用。所述蛋白增敏剂联合肿瘤化疗药物使用，所述肿瘤化疗药物是指阿霉素、表阿霉素、柔红霉素或者紫杉醇中的一种或几种；所述肿瘤是指乳腺癌、肝癌、肺癌、上皮细胞癌或者白血病。

本发明所述Survivin突变体蛋白的制备方法及其基因序列参照中国专利ZL 200510026847.8。 

本发明的优点在于：重组蛋白TmSm在本实验室前期研究中发现其对癌细胞具有快速、显著的抑生长和促凋亡活性，而不影响正常细胞生长。本发明中根据survivin蛋白在细胞信号通路中的特殊作用以及其对多药耐药逆转的影响，将化疗药物（也称化学药物）与TmSm联合使用，发现TmSm能有效促进化学药物的杀伤作用，有效降低化学药物的使用量，增加化学药物对细胞的杀伤作用，是一种有效的肿瘤化疗的增敏剂。