[发明专利]一种杆菌肽锌的制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于有机化学领域，涉及一种在溶液中肽的一般制备方法，具体地说，涉及一种在杆菌肽溶液中制备杆菌肽锌的方法。它以杆菌肽发酵液为原料，对其采取分离、提取等化学以及物理方法，最终获得杆菌肽锌。

背景技术：

杆菌肽锌(Bacitracin zinc，缩写为BcZn，CAS1405-89-6)是一种锌和杆菌肽的络合物，为白色或类白色粉末，有特臭、味苦。该物质在水、甲醇、丙酮、氯仿中几乎不溶，而易溶于吡啶中，在乙醚中微溶。杆菌肽锌是一种有效的窄谱多肽抗生素，其抗菌谱与青霉素类似，主要针对革兰氏阳性球菌和杆菌，对少数革兰氏阴性菌、螺旋体及放线菌也有一定的抑制作用，具有高效、低毒、残留量少等优点。因此，杆菌肽锌不仅是一种重要的抗生素药物，也是安全性良好的畜禽抗生素饲料添加剂。

杆菌肽锌是Zn²⁺与杆菌肽的组氨酸的咪唑基的δ-N、噻唑啉环的硫原子和谷氨酸的羧酸酯形成的络合物。

现有杆菌肽锌生产技术主要通过微生物发酵法制备，以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和B类地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)发酵液为原料，发酵液与氧化锌或氯化锌混合后，真空蒸发浓缩，使干基物质含量从4.5％～5％提高到17％～20％，再经喷雾干燥得到杆菌肽锌。该方法得到的产品组份复杂，只能用于饲料添加剂。

美国专利US2809892公开了一种水溶性的锌盐制备杆菌肽锌的方法，将锌盐加入到酸化后的杆菌肽发酵液中，提高混合物的pH值，杆菌肽锌沉淀出来，分离出杆菌肽锌络合物，再进行干燥，该方法存在金属氢氧化物的共沉淀的问题，杆菌肽含量不超过4％～8％。美国专利US393769公开了一种不含氢氧化锌制备杆菌肽锌的方法，但是用氨根离子络合过量的锌离子收率较低。

杆菌肽锌的制备方法已经不少，但是，这些方法运用在工业生产中，都存在不少困难。

发明内容：

本发明的目的是提供一种杆菌肽锌的制备方法，该方法具有效率高、设备简单、经济性好、纯度高、能耗低、可在常温下连续操作等特点，特别适合工业化生产。

本发明是通过如下步骤实现的：

在杆菌肽溶液中加入碱性溶液，调节PH＝8～11，加入无机锌成盐，用无机酸调节PH＝5～7，搅拌1～2小时，静置5～10小时。然后通过分离、干燥、粉碎、筛分、检验、成品包装等生产步骤得到合格的杆菌肽锌。所述杆菌肽溶液是效价大于5000u/ml，电导小于2000μs/cm的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和B类地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)发酵液的提取分离溶液。

所述碱性溶液是氨水、氢氧化钠中的一种。

所述无机锌是氧化锌、氯化锌、硫酸锌的一种。

所述无机酸是盐酸、硫酸的一种。

本发明方法制得的杆菌肽锌的锌含量为4.0～6.0％，杆菌肽A含量大于40.0％，杆菌肽A、B₁、B₂和B₃的总量大于70.0％，效价大于65U/g。

本发明方法制得的杆菌肽锌直接作为医用注射剂、软膏等制剂的原料。

具体实施方式：

实施例一

在100L杆菌肽溶液中加入1.5M氢氧化钠溶液，调节PH＝8～11，加入2.3Kg 30％氯化锌溶液成盐，用盐酸调节PH＝5～7，搅拌1～2小时，静置6～7小时。再通过离心机分离后装入沸腾干燥箱进行干燥，得到杆菌肽锌11.2Kg。

实施例二

在100L杆菌肽溶液中加入1.5M氢氧化钠溶液，调节PH＝8～11，加入3.2Kg 30％硫酸锌溶液成盐，用盐酸调节PH＝5～7，搅拌1～2小时，静置6～7小时。再通过离心机分离后装入沸腾干燥箱进行干燥，得到杆菌肽锌12.6Kg。

实施例三

在100L杆菌肽溶液中加入1.5M氢氧化钠溶液，调节PH＝8～11，加入3.2Kg 30％硫酸锌溶液成盐，用硫酸调节PH＝5～7，搅拌1～2小时，静置6～7小时。再通过离心机分离后装入沸腾干燥箱进行干燥，得到杆菌肽锌11.3Kg。

实施例四

在100L杆菌肽溶液中加入1.5M氢氧化钠溶液，调节PH＝8～11，加入1.9Kg氧化锌和7.5Kg水，搅拌2小时，用硫酸调节PH＝5～7，搅拌1～2小时，静置6～7小时。再通过离心机分离后装入沸腾干燥箱进行干燥，得到杆菌肽锌9.8Kg。

以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征以及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明并不限于这里所描述的特殊实例和实施方案。在这里包含这些特殊实例和实施方案的目的在于帮助本领域中的技术人员实践本发明。任何本领域中的技术人员很容易在不脱离本发明精神和范围的情况下进行进一步的改进和完善，因此，本发明只受到本发明权利要求的内容和范围的限制，其意图涵盖所有权利要求所限定的本发明精神和范围内的备选方案和等同方案。