[发明专利]一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体为一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法。

背景技术

雷公藤药材系卫矛科雷公藤属（Tripterygium Hook.f.）植物的根，具有抗炎、抗菌、免疫调节、抗肿瘤及抗生育等多种药理作用，其原生药及其各类制剂的临床应用极为广泛，用于治疗类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肾脏病和多种皮肤病，均取得良好的疗效，尤其是治疗各种免疫亢进性疾病的首选药物。

通常雷公藤制剂多是雷公藤根心部分用水（乙醇）和氯仿（乙酸乙酯）提取、经柱色谱分离得到的一种有效部位，系极性较大的脂溶性成分的混合物，其主要活性成分是二萜内酯类及生物碱类化合物，但其中的主要活性成分同时又是毒性成分，治疗安全范围比较窄，临床使用的不良反应时有报道。有资料统计，雷公藤的毒副作用在传统药物中居第三位，仅次于洋金花和乌头。因此，严格控制雷公藤制剂的质量是当前雷公藤应用最关键的问题，而药材质量的控制是首要的环节。目前，对于雷公藤药材的质量评价多集中于主要有效成分雷公藤甲素在生药、粗提物以及各种制剂中的含量测定等方面，但是单一化学成分不能全面地反映药材质量。建立一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，为雷公藤药材的质量控制提供参考，为最终实现雷公藤药材质量的稳定可控奠定基础。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法的技术方案，可同时测定二萜内酯类化合物与生物碱类成分，精确度高，稳定性好，为科学评价和有效控制雷公藤药材的内在质量提供可靠方法。

所述的一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，其特征在于采用高效液相色谱法进行含量测定，以乙腈-水溶剂为流动相进行梯度洗脱，乙腈的体积分数为55-65%，洗脱时间为155-165 min，流速为0.70-0.80mL/min，二极管阵列检测器设定扫描波长为220-230 nm，柱温为24-26℃，进样量为18-22 μL。

所述的一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，其特征在于乙腈的体积分数为60-63%，洗脱时间为160-163 min，流速为0.70-0.80mL/min。

所述的一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，其特征在于二极管阵列检测器设定扫描波长为225-228 nm。

所述的一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，其特征在于柱温为25℃。

所述的一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，其特征在于进样量为19-20 μL。

上述一种同时测定雷公藤药材中多个活性成分含量的方法，可同时测定雷公藤药材中雷公藤内酯酮、雷公藤甲素、雷公藤植碱、雷公藤新碱、雷酚内酯、雷公藤吉碱、雷公藤次碱等多个活性成分，其精确度高，稳定性好，解决了目前药材质量评价不能全面地反映药材质量的问题，为科学评价和有效控制雷公藤药材的内在质量提供可靠方法，为最终实现雷公藤药材质量的稳定可控奠定基础。

本申请文件中涉及的百分比除另有说明外，固体物质为质量比，液体物质为体积比。

附图说明

图1为7个对照品的HPLC色谱图（图中峰序号：1-雷公藤内酯酮；2-雷公藤内酯醇；3-雷公藤植碱；4-雷公藤新碱；9-雷酚内酯；12-雷公藤吉碱；13-雷公藤次碱）；图2为不同产地雷公藤药材根皮HPLC指纹图谱（由上向下排列顺序为：98-2，96-2, 75-2, 71-2, 63-2, 54-2，46-2, 43-2, 33-2, 20-2, 193-2）；图3为不同产地雷公藤药材木质部HPLC指纹图谱（由上向下排列顺序为：193-1，96-1，75-1，71-1, 63-1, 54-1, 46-1, 43-1, 33-1, 20-1, 98-1）；图4-10分别为7个对照化合物色谱峰的紫外吸收光谱。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明作进一步说明。