[发明专利]胶原靶向治疗增生性瘢痕蛋白药物的制备及应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及免疫学领域的机体免疫功能调节及基因的重组表达技术领域的人白细胞介素10（human interlenkin 10, hIL-10）与胶原特异结合的CBD多肽在基因水平融合后所表达的重组蛋白及其该重组蛋白应用。

背景技术

皮肤损伤愈合后，瘢痕仍继续增殖，即可发展成增生性瘢痕。增生性瘢痕突出皮面，形状不规则，高低不平，潮红充血，质地实韧。有灼痛和瘙痒感，于环境温度增高，情绪激动，或进食辛辣刺激性食物时症状加剧。增生往往延续几月或几年后才逐渐发生退行性变化，表现为突起高度减低，颜色转暗，充血消退,变软。有些最终可以平复，痛痒症状也大为减轻或消失。增生瘢痕，好发于损伤深度仅及真皮的创伤，如深2度烧伤和切取厚的中厚度片的供皮区创面等，偶尔亦见于较深的创伤和手术切口。

增生瘢痕与正常瘢痕的病理组织差别，仅在于瘢痕深部胶原纤维的增厚，排列不规则，或呈旋涡形，或缠绕成绳索状。究其形成原因，是因为瘢痕组织中胶原蛋白过度沉积，胶原蛋白的合成代谢超常持续进行，超过分解代谢的速度，在相当长的时间内，大量形成胶原纤维最终形成增生瘢痕。

基因工程是在分子生物学和分子遗传学综合发展基础上于本世纪70年代诞生的一门崭新的生物技术科学。1989年Fiorentino等发现小鼠Th2细胞株产生一种新的细胞因子，能抑制Th1细胞株细胞因子mRNA的转录，称为细胞因子合成抑制因子（cytokine synthesis inhibitory factor，CSIF），同年命名为白细胞介素10（interlenkin 10，IL-10）。人成熟IL-10分子为160氨基酸残基，分子量18.7kDa，pI8.1。白细胞介素10（IL-10）是人体多种细胞产生的重要免疫调节细胞因子，具有广泛的生物学活性，包括免疫抑制、抗炎及免疫调节特性，主要生物学功能是限制和终止炎症反应，调节多种免疫细胞的分化和增殖，同时也具有调理免疫刺激的特性，清除感染和非感染的颗粒。体内外和动物实验表明IL-1在炎症、恶变和自身免疫性疾病方面都发挥了重要功能，在临床上应用于治疗急、慢性炎症疾病、自身免疫性疾病如炎性肠炎、类风湿性关节炎、克隆病、多发性硬化症、银屑病等。

但针对增生性瘢痕，目前还没有有效的解决方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种胶原靶向hIL-10重组蛋白（简称CBD-IL-10）及其临床应用，该重组蛋白既保持了hIL-10的生物学活性，又增加了hIL-10在体内的靶向性，不仅赋予了该蛋白具有与hIL-10同样的抗病毒、抗肿瘤以及机体免疫功能的活性，更为重要的是其在伤口愈合过程中能够与胶原特异靶向结合，从而预防抑制瘢痕的形成。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：胶原靶向治疗增生性瘢痕蛋白药物的制备中所采用的一种靶向CBD-IL-10重组蛋白，其氨基酸序列如下所示：

H₂N- Met Ser Pro Gly Gln Gly Thr Gln Ser Glu Asn Ser Cys Thr His Phe Pro Gly Asn Leu Pro Asn Met Leu Arg  Asp Leu Arg Asp Ala Phe Ser Arg Val Lys Thr Phe Phe Gln Met Lys Asp Gln Leu Asp Asn Leu Leu Leu Lys  Glu Ser Leu Leu Glu Asp Phe Lys Gly Tyr Leu Gly Cys Gln Ala Leu Ser Glu Met Ile Gln Phe Tyr Leu Glu  Glu Val Met Pro Gln Ala Glu Asn Gln Asp Pro Asp Ile Lys Ala His Val Asn Ser Leu Gly Glu Asn Leu Lys  Thr Leu Arg Leu Arg Leu Arg Arg Cys His Arg Phe Leu Pro Cys Glu Asn Lys Ser Lys Ala Val Glu Gln Val  Lys Asn Ala Phe Asn Lys Leu Gln Glu Lys Gly Ile Tyr Lys Ala Met Ser Glu Phe Asp Ile Lys Ile Asn Tyr

其中：H₂N-’代表蛋白质氨基端（N末端），‘-COOH’ 代表蛋白质羧基端（C末端）。

上述靶向hIL-10重组蛋白在作为治疗增生性瘢痕及瘢痕疙瘩疾病药物的应用。