[发明专利]一种从沙苑子中提取纯化沙苑子苷的方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然药物化学技术领域，具体涉及一种从沙苑子中提取纯化沙苑子苷的方法。

背景技术：

沙苑子来源于豆科植物扁茎黄芪Astragalus complanatus R.Br.的干燥成熟种子。甘，温。归肝、肾经。具有补肾助阳，固精缩尿，养肝明目的功效。用于肾虚腰痛，遗精早泄，遗尿尿频，白浊带下，眩晕，目暗昏花。有文献报道沙苑子对血液流变学、免疫功能、血压和脑血流量均有影响，并且还有解热镇痛、镇静、耐寒、抗疲劳、抗炎和降脂保肝的作用。沙苑子所含化学成分主要有氨基酸、黄酮类、三萜类、脂肪酸以及微量元素等。其中黄酮是沙苑子的主要有效成分之一，具有许多药理活性。药理研究表明沙苑子总黄酮有明显的降低血清胆固醇、甘油三脂，减轻肝脂肪变形作用，还可降低脂蛋白-胆固醇含量。近年来研究认为沙苑子总黄酮可保护大鼠重要器官免受运动损伤，明显提高大鼠的运动能力，抑制肝纤维化形成，抗肿瘤E4-63，此外对SHR和RHR-83有明显的降压作用。沙苑子苷A是沙苑子黄酮的主要特征性成分，且在沙苑子中的含量较高，也是沙苑子保肝抗肝纤维化的主要有效成分之一。

吴文倩等在文献“沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定”中介绍了沙苑子苷A对照品的制备方法，该方法取沙苑子粗粉石油醚脱脂，80％乙醇提取，ZTC-5黄酮大孔吸附树脂吸附，50％乙醇洗脱，经聚酰胺柱层析，水及不同浓度乙醇梯度洗脱，再上硅胶柱，用醋酸乙酯∶甲醇梯度洗脱，醋酸乙酯∶甲醇(10∶2)洗脱部位析出沙苑子苷A结晶，甲醇进行多次重结晶，得淡黄色针状结晶。此法经过三次柱层析，生产周期长，损失较大，回收率低，难以扩大生产。

申请号为200910057073.3的中国专利介绍了一种沙苑子苷A的制备方法，该法采用80％乙醇提取、乙酸乙酯萃取、水饱和正丁醇萃取，然后用大孔树脂吸附，10-30％甲醇、50-70％甲醇洗脱，50-70％乙醇洗脱部分浓缩至干，甲醇溶解，上反相C18柱，30-50％甲醇洗脱，浓缩至干、重结晶即得，纯度在98％以上。此法使用大量有机溶剂和有毒的甲醇溶液，溶剂残留较大。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种从沙苑子中提取纯化沙苑子苷的方法，尤其是采用膜滤技术、大孔树脂吸附、中压柱层析方法制备高纯度沙苑子苷的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种从沙苑子中提取纯化沙苑子苷的方法，其特征在于包括以下步骤：取沙苑子用碱性水或碱性稀醇溶液提取，过滤，提取液加入超滤膜系统，收集透过液，透过液浓缩后再加酸调pH至3-5，沉淀加热水溶解，放冷，用石油醚萃取2-4次，除去脂溶性杂质，水层加入沉淀剂澄清，液体经大孔树脂吸附，40-70％乙醇洗脱，洗脱液浓缩成浸膏，加入中压硅胶柱分离纯化，乙酸乙酯-乙醇梯度洗脱，氯仿-甲醇(3∶1)重结晶即得沙苑子苷。

所述的碱性水为氨水溶液、氢氧化钠溶液、碳酸氢钠溶液、石灰水，所述的碱性稀醇溶液中醇为乙醇，浓度为40-60％，液料比为8-20∶1。

所述的提取方法为加热回流法、超声提取、渗漉提取、微波提取或煎煮法。

所述的超滤膜为截留分子量4000-10000的管式复合超滤膜。

所述的石油醚加入量为沉淀体积的4-8倍。

所述的沉淀剂为ZTC澄清剂、CTS中药澄清剂、去乙酰壳聚糖中的任一种，加入量为液体的0.6％-2.2％。

所述的大孔树脂为DS401、HZ818、LS-303、ADS-21中的一种，洗脱剂用量为4-8倍柱体积。

所述的中压硅胶柱柱长为50-300cm，柱直径为5-100cm，填充硅胶目数为100-300目，柱压为0.1-4MPa。

所述的乙酸乙酯-乙醇混合溶剂比例为20∶1-2∶1。

本发明的有益效果：生产成本低、生产周期短、产品纯度高，所用试剂低毒性，可回收利用，便于工业连续化生产。

具体实施方式：

实施例1：