[发明专利]一种获得高免鸡蛋的方法

说明书

技术领域

本发明涉及禽类用生物制品技术领域，尤其是一种获得高免鸡蛋的方法。

背景技术

目前，我国主要利用蛋黄液抗体预防鸭病毒性肝炎的发生，但现有蛋黄液抗体存在诸多缺点，例如蛋黄内含有一些可以垂直传播给雏鸡/鸭的病原，如霉形体、沙门氏菌、腺病毒及呼肠孤病毒等，如在蛋黄抗体生产中未进行严格消毒和灭活，便会导致人为传毒。而高免蛋则成为鸭病毒性肝炎精制异源卵黄抗体提取过程中较为安全有效的选择。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种获得高免鸡蛋的方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种获得高免鸡蛋的方法，具体步骤为：

(1)使用禽类专用抗菌肽饲料添加剂连续饲喂健康产蛋鸡；

(2)制备免疫用油乳剂抗原：

A：将冷冻保存的鸭肝炎病毒AV2111毒种稀释后接种10-11日龄SPF鸡胚并收集死亡鸡胚，收集胚体病变明显的鸡胚尿囊液；

B：将步骤A收集的尿囊液加入终浓度为0.1％的福尔马林密封灭活，取灭活后的尿囊液与无菌吐温-80以19∶1(W/W)的比例混合后制成水相；取白油、司本、硬脂酸铝以93∶5∶2(W/W/W)的比例混合，搅拌均匀后，高压灭菌20分钟制成油相；

C：将步骤B所制备的水相和油相以5∶2(V/V)的比例混合，乳化制成免疫用油乳剂抗原；

(3)免疫产蛋鸡，制备高免鸡蛋：将步骤(2)所制备的油乳剂抗原免疫步骤(1)处理过的产蛋鸡，免疫方式为皮下注射，剂量为1毫升/只，免疫次数为3次，第1次与第2次免疫间隔10天，第2次与第3次免疫间隔14天，将上述经过3次免疫后的产蛋鸡正常饲喂七天后收集鸡蛋，即为高免鸡蛋。

优选的，上述获得高免鸡蛋的方法，具体步骤为：

(1)使用禽类专用抗菌肽饲料添加剂连续饲喂健康产蛋鸡3周，每日添加一次，日添加量为基础日粮的0.1％-0.3％。

(2)制备免疫用油乳剂抗原：

A：将冷冻保存的鸭肝炎病毒AV2111毒种稀释200倍后接种10-11日龄SPF鸡胚，接种量为100微升/只，置于37℃培养箱中孵育，48-96小时后收集死亡鸡胚，收集胚体病变明显的鸡胚尿囊液；

B：将A步骤收集的尿囊液加入终浓度为0.1％的福尔马林37℃密封灭活48小时，取灭活后的尿囊液与无菌吐温-80以19∶1(W/W)的比例混合后制成水相；取白油、司本、硬脂酸铝以93∶5∶2(W/W/W)的比例混合，搅拌均匀后，121℃高压灭菌20分钟制成油相；

C：将B步骤所制备的水相和油相以5∶2(V/V)的比例混合，乳化制成免疫用油乳剂抗原；

(3)免疫产蛋鸡，制备高免蛋：将步骤(2)所制备的油乳剂抗原免疫步骤(1)处理过的产蛋鸡，免疫方式为皮下注射，剂量为1毫升/只，免疫次数为3次，第1次与第2次免疫间隔10天，第2次与第3次免疫间隔14天；3次免疫过后，每隔7周进行免疫一次，方式为皮下注射，剂量为1毫升/只，将上述经过3次免疫后的产蛋鸡正常饲喂七天后收集鸡蛋，即为高免鸡蛋。

优选的，上述获得高免鸡蛋的方法，其中步骤(1)中禽类专用抗菌肽饲料添加剂的日添加量为基础日粮的0.2％。

优选的，上述获得高免鸡蛋的方法，其中步骤(1)中的禽类专用抗菌肽饲料添加剂为肽轻松B-001禽类专用制剂。

本发明的有益效果是：

上述获得高免鸡蛋的方法，大大减小了高免鸡蛋内可垂直传播给雏鸡/鸭的病原，如霉形体、沙门氏菌、腺病毒及呼肠孤病毒等的机率，操作简单，适合大规模生产的需要，为高免鸡蛋的获得提供了新的思路。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的；以下实施例中的％，如无特别说明，均为质量百分含量。

实施例1

一种获得高免鸡蛋的方法，具体步骤为：

(1)使用肽轻松B-001禽类专用制剂连续饲喂健康产蛋鸡3周，每日添加一次，日添加量为基础日粮的0.2％。

(2)制备免疫用油乳剂抗原：

A：将冷冻保存的鸭肝炎病毒AV2111毒种(购自中国兽药监察所)稀释200倍后接种10-11日龄SPF鸡胚(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)，接种量为100微升/只，置于37℃培养箱中孵育，48-96小时后收集死亡鸡胚，收集胚体病变明显的鸡胚尿囊液；