[发明专利]非外置鞘液流式细胞术在线分析藻类和有色可溶性有机物的方法

权利要求书

1. 非外置鞘液流式细胞术在线分析藻类和有色可溶性有机物的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）样品采集与处理：用进样器采集水样，进样流速为1-2 cm/s，水样被进样器采集后，首先滤除粒径大于1 mm的泥沙颗粒，然后在进样器内部经过筛选排除空气和砂粒，余下的浮游植物、浮游动物和与它们密度相差不大的砂粒作为待检测颗粒，进入流动室，进行流式细胞计数和其它分析；对于粒径介于50~100 μm的砂粒而言，它们的沉降速率大于进样流速，因此不会被进样器吸入； 

（2）藻类检测：步骤（1）中的待检测颗粒被不含任何颗粒的鞘液包裹着流过流动室，所述鞘液为非外置鞘液；鞘液包绕着待检测颗粒高速流动，组成一个圆形的流束，待检测颗粒在鞘液的包被下单行排列，依次通过藻类检测区域；这个过程中，颗粒间的距离被拉开，当颗粒被与之呈90度角的激光束照射时，颗粒的散射光和荧光会被检测系统检测；所述检测系统检测颗粒的前向散射光、侧向散射光和多色荧光，这些光信号被检测系统收集储存以对不同类型的颗粒进行聚类分析；

（3）滤除藻类：在所述流动室内的藻类检测区域后设置一个过滤器，将已经被检测的藻类等物质滤除，滤液在流动室内继续流动并通过CDOM检测区域；

（4）CDOM检测：步骤（3）中的滤液流过CDOM检测区域，被波长为355nm的激光束照射，检测系统收集滤液在380~600nm的波长范围内的光吸收信号和荧光信号，并将信号输送到智能仪表； 

（5）结果输出与计算：智能仪表根据接收到的光吸收信号和荧光信号，计算吸光度D(λ)，然后结合光程路径r，根据下面的公式（1）计算获得波长λ未校正的吸收系数α(λ)′，该吸收系数α(λ)′用于表示CDOM的浓度；

α(λ)′=2.303D(λ)/r               （1）

式（1）中：λ为波长；α(λ)′为波长λ未校正的吸收系数，其单位为（m-1）；D(λ)为吸光度；r为光程路径，其单位为m。

2.如权利要求1所述的非外置鞘液流式细胞术在线分析藻类和有色可溶性有机物的方法，其特征在于：对步骤（5）中获得的波长λ未校正的吸收系数α(λ)′进行校正，以消除滤液中可能残留细小颗粒而引起的散射效应，校正后获得波长λ的吸收系数α(λ)；校正根据下面的公式（2）进行；

α(λ)=α(λ)′-α(750)×λ/750              （2）

式（2）中：α(λ)为波长λ的吸收系数，α(λ)′为波长λ未校正的吸收系数，它们的单位都为（m-1）。

3.如权利要求1所述的非外置鞘液流式细胞术在线分析藻类和有色可溶性有机物的方法，其特征在于：所述步骤（2）中的藻类检测采用波长范围为300~800nm的激光束照射。

4.如权利要求1所述的非外置鞘液流式细胞术在线分析藻类和有色可溶性有机物的方法，其特征在于：所述鞘液采用纯净水、磷酸盐缓冲液或碳酸盐缓冲液。

5.如权利要求4所述的非外置鞘液流式细胞术在线分析藻类和有色可溶性有机物的方法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液的pH值范围在2~11之间。