[发明专利]一种酵母及其多阶段发酵生产赤藓糖醇的方法

权利要求书

1.一种酵母，其分类命名为酿酒酵母，菌种的拉丁学名是Saccharomyces cerevisiae，参据的微生物：NJWGYH30566，保藏日期是2010年11月15日，保藏中心登记入册编号是CGMCC No.4349。

2.一种如权利要求1所述的酵母在多阶段发酵生产赤藓糖醇方法中的应用。

3.一种利用权利要求1所述的酵母多阶段发酵生产赤藓糖醇的方法，其具体步骤如下：利用酵母培养发酵种子液；将发酵培养基进行接种前准备灭菌；然后将发酵种子液按发酵培养基体积的2-6％比例接种于发酵培养基，通过控制葡萄糖浓度进行有氧多阶段发酵，制得赤藓糖醇。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的培养发酵种子液为从PDA培养基上挑1-2个酵母Saccharomyces cerevisiae菌落到装种子培养基的三角瓶中，其中装液量为三角瓶体积的5-10％，在温度为25～35℃，pH为5.5-7.5，转速为150-200rpm的摇床中培养30-40h，得到发酵种子液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述的种子培养基组成为：葡萄糖150-250g/L，酵母膏10-20g/L，玉米浆3-5g/L。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的发酵培养基接种前准备为将发酵培养基溶于水中，搅拌均匀，倒入发酵罐中，通入冷却水，灭菌，灭菌前校正溶解氧DO为0％；其中所述的发酵培养基的组分：葡萄糖200-300g/L，酵母膏20-30g/L，玉米浆10-20g/L，MgSO₄·7H₂O 0.3-0.5g/L，MnCl₂·4H₂O 0.005-0.015g/L，CuSO₄·5H₂O0.005-0.015g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.005-0.01g/L，泡敌0.3-0.5g/L。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的接种过程中发酵培养基的培养温度25～35℃，控制pH 5.5-7.5；调节好转速、空气流量及罐压以校正溶氧DO达100％；所述的有氧多阶段发酵为发酵过程前40～60h的菌体生长阶段，控制空气流量为10-20L/min，搅拌速度为300-400rpm，溶氧水平DO控制在30-50％；位于发酵过程60h之后的赤藓糖醇产生阶段，当细胞光密度水平达到25-30时，调节空气流量为20-30L/min，搅拌速度为100-200rpm，溶解氧水平控制在10-30％。

8.根据权利要求3所述的方法，在菌体生长阶段，当葡萄糖浓度低于150g/L时，开始流加底物A，并以发酵液中葡萄糖的浓度来指导底物流加速度，使发酵罐内葡萄糖浓度控制在130-150g/L范围内发酵；在赤藓糖醇生长阶段，当葡萄糖浓度低于50g/L时，开始流加底物B，并以发酵液中葡萄糖的浓度来指导底物流加速度，使发酵罐内葡萄糖浓度控制在30-50g/L范围内发酵60-80h；其中流加底物A组成为：葡萄糖800-1000g/L，酵母膏100-200g/L；底物B组成为：葡萄糖800-1000g/L，酵母膏100-200g/L，玉米浆10-20g/L，肌醇六磷酸MgSO₄·7H₂O 5-15g/L。