[发明专利]一种口服蛋白类药物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及口服蛋白类药物的制备方法，特别涉及改性壳聚糖作为药物载体的口服蛋白类药物制备方法。

背景技术

随着DNA重组技术的发展，很多蛋白质、酶、多肽等生物活性分子成为商业药品投入临床应用。虽然口服是蛋白质类药物最方便、最易被病人接受的给药方式，但是由于蛋白质类药物在消化道中极易酸变性及酶降解，另外蛋白质大分子药物难以透过肠壁粘膜吸收入血，所以目前蛋白质及多肽药物仍主要通过注射方式给药，即使这种给药方式给病人带来痛苦且容易导致感染。近年来口服蛋白质类药物载体成为药剂学的研究热点，pH敏感的天然高分子水凝胶材料受到了极大的关注。

壳聚糖是商业上大规模生产的一种天然多糖，由于其高度的生物相容性、无毒、可生物降解、肠粘膜粘附性及打开肠细胞紧密连接等性能，壳聚糖被广泛用于制药领域。壳聚糖已被用来作为激素、蛋白质、酶和基因的载体。由于其表观pKa＝5.6，壳聚糖仅溶于酸性环境中，这限制了它作为蛋白质类药物口服载体的应用。

海藻酸钠是海藻酸的一种可溶性盐，可以在多价阳离子如钙离子存在或在较低的酸性环境下形成凝胶。由于海藻酸钠凝胶易于制备，加它的多孔性、生物相容性及粘膜粘附性等内在属性，海藻酸钠衍生物被广泛应用于医药领域。各种海藻酸钠，壳聚糖复合物也已被用来作为药物靶向输送和控释的载体。

目前，国内外只要是把壳聚糖和海藻酸钠用乳化交联等方法直接制备水凝胶，这种方法所制备的水凝胶在酸性环境下容易崩解。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种在胃液环境下不溶胀而在小肠环境溶胀的药物制备方法。

本发明解决技术问题的技术方案为：一种口服蛋白类药物的制备方法，包括(a)N-α-戊二酸壳聚糖的合成步骤、(b)双重交联水凝胶的制备步骤；

所述的(b)双重交联水凝胶的制备步骤为：

将重量浓度为0.5-3％的N-α-戊二酸壳聚糖溶液，用0.5-2M的氢氧化钠溶液调节N-α-戊二酸壳聚糖溶液的pH至0.5-6.5，再加入重量浓度为0.5-3％的海藻酸钠溶液混匀，加入口服蛋白类药物，滴入到重量浓度1.5-2％氯化钙溶液中，滴加完毕后，搅拌交联0.5-3h，过滤，洗涤，再浸入到重量浓度1.5-2的％硫酸钠溶液搅拌交联0.5-4h，过滤、洗涤、室温下干燥至恒重，海藻酸钠、N-α-戊二酸壳聚糖、口服蛋白类药物的质量比为1∶0.3-0.9∶0.5-1.5。

所述的口服蛋白类药物为胰岛素、牛血清蛋白。

所述的(a)N-α-戊二酸壳聚糖的合成步骤：

将壳聚糖溶于的1-2％(v/v)乙酸溶液中，再加入α-酮戊二酸，用0.5-2M氢氧化钠溶液调节上述溶液的pH值为3.5-5.5，室温反应2-6小时，再加入硼氢化钠，用0.1-1M盐酸溶液调节上述混合物的pH值为4.5-7.5，反应不小于24小时，加入90-95％(v/v)乙醇终止反应，过滤，洗涤，干燥，即得到N-α-戊二酸壳聚糖，壳聚糖、α-酮戊二酸、硼氢化钠的质量比为1∶1.5-3.5∶0.3-1.5。

如图1所示：用α-酮戊二酸修饰壳聚糖，可以改善其水溶性，而壳聚糖具有高度的生物相容性、无毒、可生物降解、肠粘膜粘附着性及打开肠细胞紧密连接等性能，海藻酸钠是海藻酸的一种可溶性盐，可以在多价阳离子如钙离子存在或在较低的酸性环境下形成凝胶。当把两者混匀之后，再双重交联可能够得到酸性条件基本不溶胀，而在碱性条件下溶胀性能。

本发明与现有技术相比，所制备的药物载体，在酸性条件下不易崩解，并且药物容易被吸收。

附图说明

图1是N-α-戊二酸壳聚糖合成的化学原理图。

图2是海藻酸钠/N-α-戊二酸壳聚糖凝胶珠、海藻酸钠及N-α-戊二酸壳聚糖的红外光谱。

图3是模拟胃的pH环境下凝胶珠(实施例1、2、3、4、5)的溶胀特性。

图4是模拟小肠的pH环境下凝胶珠(实施例1、2、3、4、5)的溶胀特性。

图5是模拟结肠的pH环境下凝胶珠(实施例1、2、3、4、5)的溶胀特性。

图6是牛血清蛋白BSA的包载率。

图7是凝胶珠中，BSA在模拟胃(pH1.2)的缓冲液中累积释放。

图8是凝胶珠中，BSA在模拟小肠(pH6.8)的缓冲液中累积释放。

图9是凝胶珠中，BSA在模拟结肠(pH7.4)的缓冲液中累积释放。

图10是凝胶珠放入模拟胃(SGF)缓冲液中3h，然后再放入模拟结肠(SCF)缓冲液中4h，BSA累积释放率。

具体实施方式