[发明专利]用于鉴定短小乳杆菌的引物序列及其应用有效
| 申请号: | 201010574429.3 | 申请日: | 2010-12-06 |
| 公开(公告)号: | CN102094089A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
| 发明(设计)人: | 张军;田子罡;闫秩洁;王安如;张广民 | 申请(专利权)人: | 北京大北农科技集团股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 100080 北京市海淀区中*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 鉴定 短小 杆菌 引物 序列 及其 应用 | ||
1.用于鉴定短小乳杆菌的引物序列,其特征在于:正向引物具有序列表中SEQID NO:1所述的碱基序列,反向引物具有序列表中SEQ ID NO:2所述的碱基序列。
2.如权1所述的引物序列在鉴定短小乳杆菌中的应用,其特征在于鉴定过程如下:(1)制备待测菌株的模板DNA;
(2)使用权1所述的引物对步骤(1)制备的模板DNA进行PCR扩增;
(3)利用琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,在200bp处产生特异性扩增条带的菌株,则鉴定为短小乳杆菌。
3.如权2所述的引物序列在鉴定短小乳杆菌中的应用,其特征在于制备待测菌株的模板DNA过程如下:挑取短小乳杆菌的单菌落至50-100微升的超纯水中,置于沸水中水浴5-15分钟,于-80℃冻存15-40分钟,至沸水中水浴5-15分钟,4000-8000转/分钟离心5-10分钟,取上清即得模板DNA。
4.如权2所述的引物序列在鉴定短小乳杆菌中的应用,其特征在于PCR扩增程序如下:95℃预变性5min,94℃变性30s,58℃退火30s,72℃延伸20s,进行30次循环,最后72℃延伸10min。
5.如权2所述的引物序列在鉴定短小乳杆菌中的应用,其特征在于电泳检测PCR产物采用的为2%的琼脂糖凝胶电泳,并用溴化乙锭染色。
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