[发明专利]用于抗血栓的寡肽及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及用于溶血栓的寡肽，尤其涉及如通式6a-f所示的化合物，属于生物医药领域。

背景技术

P6A(ARPAK)为纤维蛋白β链降解产物之一，具有溶血栓活性。在P6A的代谢研究中发现了代谢产物PAK。在大鼠动静脉旁路插管溶血栓模型上，PAK的溶血栓活性比母体P6A强。按照一般的认识，多肽在体内都会迅速降解。通过PAK的结构修饰延缓体内降解速率和提高溶血栓活性，是寡肽溶血栓药物研究的重要途径。

血小板膜糖蛋白GP错误！未找到引用源。b/错误！未找到引用源。a受体的活化是血小板聚集的最终共同通道，在血栓形成中起到重要作用。RGD序列作为活化GP错误！未找到引用源。b/错误！未找到引用源。a受体的特异性配体，具有抗血小板聚集作用和血栓靶向性。利用RGD序列对血栓部位活化血小板的靶向作用制备靶向溶栓药物，能够减少系统纤溶和出血并发症，同时抑制血栓部位血小板聚集。

按照一般的认识，含多肽的两亲性分子，例如脂肪醇链修饰的多肽，在适当的条件下通过分子间非共价键相互作用可发生自组装，形成纳米结构。借助纳米结构可改善多肽在体内的输送、延缓多肽在体内的降解速率和提高多肽的体内活性。

发明内容

本发明的目的在于提供通式6a-f所示的用于抗血栓的寡肽，并通过动物实验评价这些化合物的抗血栓活性，证明通式6a-f化合物除了具有良好的抗血栓活性外，还具有靶向性能和预防新栓形成的作用，以及自主装性能。

本发明是通过以下技术方案来实现本发明的：

本发明的目的之一是提供通式6a-f的化合物，

通式6a-f

其中，n为6、8、10、12、14或16。

本发明的目的之二是提供所述通式6a-f化合物的制备方法，具体包括如下步骤：

(1)在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下Boc-Pro在无水THF中与N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)缩合为Boc-Pro-Osu，在NaHCO₃存在下Boc-Pro-OSu与Ala反应生成Boc-Pro-Ala；

(2)在DCC和HOBt存在下Boc-Pro-Ala在无水THF中与Lys(Z)-OBzl缩合为Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl；

(3)在NaOH存在下，在甲醇中将Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-OBzl皂化为Boc-Pro-Ala-Lys(Z)；

(4)在DCC存在下Boc-Asp(OBzl)在无水THF中与饱和脂肪胺缩合为Boc-Asp(OBzl)-NHCH₂(CH₂)nCH₃；所述饱和脂肪胺为C8，10，12，14，16，18的饱和脂肪胺；

(5)在氯化氢-乙酸乙酯溶液中Boc-Asp(OBzl)-NHCH₂(CH₂)nCH₃脱去Boc生成Asp(OBzl)-NH CH₂(CH₂)nCH₃；

(6)在DCC和HOBt存在下Boc-Pro-Ala-Lys(Z)在无水THF中与Asp(OBzl)-NH-CH₂(CH₂)nCH₃缩合为Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-Asp(OBzl)-NHCH₂(CH₂)nCH₃；

(7)在NaOH存在下在甲醇中将Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-Asp(OBzl)-NH-CH₂(CH₂)nCH₃皂化为Boc-Pro-Ala-Lys(Z)-Asp-NH CH₂(CH₂)nCH₃；

(8)在DCC和HOBt存在下Boc-Arg(NO₂)在无水THF中与Gly-OBzl缩合为Boc-Arg(NO₂)-Gly-OBzl；

(9)在NaOH存在下在甲醇中将Boc-Arg(NO₂)-Gly-OBzl皂化为Boc-Arg(NO₂)-Gly；