[发明专利]一种用微生物发酵法制备花生膳食纤维的方法

权利要求书

1.一种用微生物发酵法制备花生膳食纤维的方法，其特征在于包含以下步骤：

第1步：制备菌种种子培养液：将冻干菌种经活化培养、扩大培养和种子培养得到菌种种子培养液；

第2步：花生粉的制备和灭菌；

第3步：发酵培养物制取：在制得的无菌花生粉中加入一定体积的无菌水、无机盐和第1步制得的菌种种子培养液，在一定温度下摇匀液体发酵培养或培养箱中固体发酵培养一定时间得到发酵培养物；

第4步：振荡培养及灭菌：发酵培养物加入一定体积的水，在一定温度的恒温水浴中振荡培养一定时间，振荡培养结束后，将液体发酵物或固体发酵物灭菌；

第5步：真空抽滤及发酵液制取：灭菌后的发酵物经真空抽滤，保留第一滤液和第一滤渣，第一滤渣用蒸馏水真空抽滤洗涤两次，得到洗涤液，将洗涤液与第一滤液合并得到发酵液；

第6步：发酵液经真空旋转蒸发浓缩得到第一浓缩液，在第一浓缩液中加入无水乙醇，摇匀，冰箱中静置过夜，取第一浓缩液与无水乙醇混合物经真空抽滤得到第二滤渣和第二滤液，第二滤液经真空旋转蒸发浓缩得到第二浓缩液，第二浓缩液加入无水乙醇，轻摇后经真空抽滤得到第三滤渣；

第7步：将第二滤渣和第三滤渣溶于沸水、离心、保留第一上清液，离心后的沉淀再经沸水溶解、离心两次，保留两次离心的上清液，与第一上清液合并，经真空旋转蒸发浓缩得到第三浓缩液；

第8步：第三浓缩液加入无水乙醇，轻摇，冰箱中静置过夜，取第三浓缩液与无水乙醇混合物离心，沉淀经干燥、粉碎得到水溶性膳食纤维产品；

第9步：第一滤渣经脱色精制得到不溶性膳食纤维产品。

2.根据权利要求1所述的用微生物发酵法制备花生膳食纤维的方法，其特征在于第1步中所述菌种活化培养方法为：用无菌吸管吸取一定体积的液体PDY第一培养基，滴入菌种管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解成悬浮状液体，取约0.2ml菌悬液，转接于PDA培养基第一斜面上，在一定温度的培养箱中培养一定时间，得到活化菌种；所述扩大培养方法为：用接种环挑取1环活化菌种于PDA培养基第二斜面上，培养箱中一定温度下扩大培养一定时间，得到扩大培养菌种；所述种子培养方法是：将PDA培养基第二斜面上的菌种用无菌水淋洗成菌悬液，再将菌悬液接入装有100ml的PDY第二培养基的三角瓶中，一定温度下摇匀振荡培养一定时间，得到菌种种子培养液；所述的液体PDY第一培养基的配方为马铃薯20g/L，葡萄糖2g/L，酵母膏1g/L，PDY第一培养基的体积为0.3～0.4ml；所述的PDA培养基第一斜面的配方为马铃薯20g/L，葡萄糖2g/L，琼脂2g/L，活化培养条件为23～32℃，静置培养2～4天；所述的PDA培养基第二斜面的配方为马铃薯20g/L，葡萄糖2g/L，琼脂2g/L，扩大培养条件为23～32℃，静置培养2～4天；所述的液体PDY第二培养基的配方为马铃薯20g/L，葡萄糖2g/L，酵母膏1g/L，种子培养条件为23～32℃，摇匀150r/min振荡培养2～4天；所述菌种为黑曲霉、绿色木霉、米根霉、白地霉、裂褶菌中的一种。

3.根据权利要求1所述的用微生物发酵法制备花生膳食纤维的方法，其特征在于第2步中所述的花生粉制备方法是将无霉烂、无虫蛀的花生壳、花生杆和花生根中的任何一种原料用流水清洗干净，在鼓风干燥箱中80℃干燥，干燥后的原料用植物粉碎机粉碎，粉碎物再经食品料理机精磨，精磨物过50目筛，收集筛下物作为提取膳食纤维的花生粉；所述的花生粉灭菌方法为花生粉在高压灭菌锅内121℃灭菌10min。