[发明专利]一种广谱性拮抗植物病原真菌的生防微生物及其应用

说明书

技术领域：

本发明涉及一种广谱性拮抗植物病原真菌的生防微生物及其应用，属微生物农药技术领域。

背景技术：

植物病原真菌的危害给种植农业带来的危害是无法估量的。中国发现的烟草真菌病害28种，所造成的经济损失占烟草病害的37.8％，其中由Phytophthoranicotianae侵入引起的烟草黑胫病危害最为严重(祝明亮，雷丽萍，2008)。云南作为我国名贵中药材三七(Panax notoginseng)的主产区，产量占全国90％以上，2009年三七农业就创收16.9亿元。Fusarium spp.等病原菌引起的三七根腐病常年发病率一般在5％～20％，严重的可损失70％以上，甚至绝收(缪作清等，2006)。由Plasmodiophora brassicae危害引起的十字花科作物根肿病发病率一般在10-30％左右(王靖等，2008)。目前，对以上病害的防治仍然以化学防治为主，由于都是土传病害，施用的一般都是高毒、高残留农药。近年来，随着人们对生活质量的日益重视，有机农业及其产品迎来了前所未有的发展契机。有机蔬菜已逐步摆上中高等收入家庭的餐桌；有机烟叶被认为是烟草行业未来的发展方向；三七出口常年面临的绿色贸易壁垒。这些有机农业种植都迫切需要高效的生物农药。

Bacillus methylotrophicus是韩国人2010年作为新种报道的一种可以代谢甲醇、促进植物生长的细菌(Madhaiyan et al.，2010)。该微生物对植物病原真菌的拮抗特性至今未见公开报道。

参考文献：

祝明亮，雷丽萍.2008.烟草微生物学.科学技术出版社，北京，P1-384.

缪作清等，2006.三七根腐病病原研究.中国农业科学，39(7)：1371-1378.

王靖等，2008.油菜根肿病症状、病原形态及产量损失研究.中国油料作物学报，30(1)：112-115.

Madhaiyan M，Poonguzhali S，Kwon SW，Sa TM.2010.Bacillus methylotrophicus sp.nov.a novel species of methanol utilizing，plant-growth promoting bacteriumisolated from rice.International Journal of Systematic and EvolutionaryMicrobiology 60：2490-2495.

发明内容

本发明的目的在于提供一种广谱性拮抗植物病原真菌的生防微生物及其应用。

本发明从烟草内生菌中筛选具有工业化生产前景的菌株，为农业生产提供一种具较好的土传真菌病害生防微生物。

本发明具体是这样实现的：

本发明人从云南烤烟品种NC297叶片内生菌中利用选择性培养基筛选、改良后获得Bacillus methylotrophicus Mo-Bm菌株。Mo-Bm已于2010年10月12日保存于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No.4207。Bacillus methylotrophicus Mo-Bm在AMS培养基(MgSO₄.7H₂O：1g，CaCl₂0.2g，EDTA 0.004g，NH₄Cl 0.5g，FeSO₄.7H₂O 0.02g，MnCl₂.H₂O 0.01g，ZnSO₄.7H₂O0.01g，琼脂18g，补水至1000ml，pH6.8)上菌落乳白色，凸起，边缘规格，生长缓慢，28℃下培养96小时菌落直径0.2-1mm，最适生长温度为28℃，最适生长pH值为7。利用引物5’-GGT TAC CTT GTT ACG ACT T-3’，5’-AGA GTT TGATCM TGG CTC AG-3’经PCR扩展该菌株的16S rRNA基因，获得的序列提交到GeneBank公共数据库，其序列号为HQ325853，此序列是鉴定该菌株的主要特征依据。Mo-Bm菌株能耐受0.5-2％(V/V)的甲醇，是鉴别该菌株的次要特征依据。