[发明专利]高效液相色谱测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及高效液相色谱技术领域，具体涉及一种高效液相色谱测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法。

背景技术

解郁丸为治疗抑郁症的现代中药，具有疏肝解郁、养心安神的功效。解郁丸由白芍、当归、柴胡、郁金等10味中药经现代工艺精制而成，柴胡是解郁丸主要药味，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d为柴胡的主要有效成分之一，产品中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量，是产品质量的重要指标之一。建立一个测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法，可以更好的控制解郁丸的产品质量，保证产品的稳定性。

发明内容

本发明的目的是建立一个测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法，可以更好的控制解郁丸的产品质量，保证产品的稳定性。

本发明的技术方案是：高效液相色谱测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法，它的步骤如下：

（1）对照品溶液的制备：称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥24~48小时的柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品，加乙醇制成每1ml乙醇含柴胡皂苷a 0.2mg、柴胡皂苷d 0.3mg的溶液；

（2）供试品溶液的制备：取解郁丸适量，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加水25ml，密塞，超声处理30分钟，取出，放冷，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次25 ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液；

（3）测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈和水的混合溶液，柱温为30~35℃，分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，读取数据。

所述高效液相色谱仪的检测器为紫外吸收检测器，检测波长为210nm。

所述乙腈和水的质量比为45：55。

所述高效液相色谱色谱柱的理论塔板数按柴胡皂苷a峰计算大于5000。

本发明的有益效果是：本发明的分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，通过高效液相色谱测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量，本品每1g含柴胡以柴胡皂苷a（C₁₂H₆₈O₁₃）和柴胡皂苷d（C₄₂H₆₈O₁₃）总量计，不得少于0.2mg，便于控制解郁丸的质量，更好的控制产品的稳定性。

具体实施方式

实施例1

高效液相色谱测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法，它的步骤如下：

（1）对照品溶液的制备：称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥24小时的柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品，加甲醇制成每1ml甲醇含柴胡皂苷a 0.2mg、柴胡皂苷d 0.3mg的溶液；

（2）供试品溶液的制备：取解郁丸适量，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加水25ml，密塞，超声（功率200W，频率28KHz）处理30分钟，取出，放冷，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取3次，每次25 ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解，移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液；

（3）测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为乙腈和水的混合溶液，乙腈和水的质量比为45：55，柱温为30℃，检测器为紫外吸收检测器，检测波长为210nm，色谱柱的理论塔板数按柴胡皂苷a峰计算为5500，分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，读取数据。

根据检测结果，计算出柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量，控制每1g解郁丸含柴胡以柴胡皂苷a（C₁₂H₆₈O₁₃）和柴胡皂苷d（C₄₂H₆₈O₁₃）总量计，不得少于0.2mg。

实施例2

高效液相色谱测定解郁丸中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量的方法，它的步骤如下：

（1）对照品溶液的制备：称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥48小时的柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品，加甲醇制成每1ml甲醇含柴胡皂苷a 0.2mg、柴胡皂苷d 0.3mg的溶液；