[发明专利]一种山茱萸多糖的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种山茱萸多糖的制备方法，尤其是一种利用超声提取、膜分离和分级沉淀提取纯化山茱萸多糖的方法。

背景技术：

山茱萸(Fructus Corni)为山茱萸科植物山茱萸Cornus Officinalis Sieb.et Zucc.的干燥果肉，又名山萸肉、药枣、肉枣等。是一种滋补类名贵药材，具有补益肝肾、涩精固脱的功效。近年来研究显示，山茱萸具有抗失血性休克、抑制血小板聚集、免疫调节、抗炎、降血糖、抗氧化、抗癌、抗菌等作用。文献“山茱萸有效化学成分的研究进展(周京华，李春生，李电东.中国新药杂志，2001，10(11)：808.)”和“山茱萸多糖的化学研究(杨云，刘建鑫，刘翠平，等.中国中药杂志，1999，24(10)：614.)”，临床研究证明，山茱萸是治疗糖尿病、冠心病和高血压病的主要药材。现代研究表明山茱萸果肉中主要成分有糖类、有机酸类及其酯类、鞣质类等，其中多糖类物质是生命代谢不可缺少的重要物质，具有多种生物活性，山茱萸多糖具有免疫调节活性和明显的抗氧化作用。

有关山茱萸多糖的提取方法报道很少，方法比较局限。现有方法是原料脱脂、水提、浓缩、洗涤、干燥，得到产品，如赵晓华等《山茱萸多糖提取工艺及理化性质研究》，脱脂使用石油醚，用量大、毒性大；工艺所用有机溶剂种类多，容易导致有效成分流失。

张丽娟等《山茱萸多糖的提取工艺优化及对大鼠局部灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用》，该文献公开的方法是超声水提、浓缩、超滤、醇沉、除蛋白、洗涤干燥所得山茱萸多糖产品纯度不高。

中国专利“一种酶解提取山茱萸多糖的方法”(申请号：200810120569.6)，该专利公开的方法是取山茱萸干燥果肉粉碎制得山茱萸干粉，加入质量为山茱萸干粉质量15～60倍的蒸馏水，加入酶于35～60℃、pH3.5～7.0下酶解0.5h～4h，酶解结束后灭酶，提取液浓缩醇沉，离心干燥即得山茱萸多糖提取物，产品纯度低。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单，生产安全，纯度较高的山茱萸多糖制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

一种山茱萸多糖的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

1)提取：将山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣加入5-10倍量(V/W)温水超声提取1-2h，重复2-3次，过滤，合并提取液；

2)除杂：上述提取液浓缩，加适量30％H₂O₂，至浅黄色，加3％三氯醋酸至不再产生混浊，离心，取上清液；

3)膜分离：上述上清液用超滤膜超滤，得截留物；

4)分级沉淀：上述截留物加适量水，先加30％乙醇沉淀，滤液再加50％乙醇，过滤，滤液加入90％乙醇，生成沉淀，滤出沉淀依次用丙酮、乙醇洗涤，真空干燥即得山茱萸多糖产品。

步骤1)中温水为30-70℃，超声频率为20KHz。

步骤2)中H₂O₂用量为浓缩液体积的1/4-1/2。

步骤3)中超滤膜为截留分子量为60000的中空纤维膜

综上所述，本发明存在以下优点：本工艺采用温水超声提取山茱萸多糖，溶剂简单；所用药材为醇提总苷后的残渣，成本较低；膜分离能有效除去小分子杂质。

采用上述技术方案制备山茱萸多糖，操作简单，成本较低，纯度较高，利于大生产操作。

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1

取山茱萸果肉醇提总苷后的干燥残渣1kg，加入5L60℃温水超声提取2h，重复3次，合并提取液。提取液浓缩至原体积的1/2，冷却至25℃，加入1.8L30％H₂O₂，搅拌，至浅黄色，加3％三氯醋酸至不再产生混浊，加入离心机离心，直到离液面交界处无白色混悬，分出澄清液体，用超滤膜超滤，截留物加400ml水，加入400ml30％乙醇沉淀，滤液再加600ml50％乙醇，过滤，滤液加入1400ml90％乙醇，放置沉淀，滤出沉淀，依次用200ml丙酮、150ml乙醇洗涤，真空干燥，即得山茱萸多糖11.8g，经HPLC检测，纯度为91.5％。

实施例2