[发明专利]酸模素的分离制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及用高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备高纯度酸模素的方法。

背景技术：

羊蹄(Rumex japonicus Houtt.)为蓼科酸模属植物，又名土大黄、金不换等，为多年生草本，资源极为丰富，广泛分布于我国华东、华中、华南等地区，生于田边、路旁、河滩、沟边湿地。其根入药，为较常用药，始载于《神农本草经》，列为下品，味苦，性寒。有杀虫、活血止血、清热解毒等功效，用于皮肤病、疥癣、各种出血及各种炎症。原源等采用高效液相色谱法对5种酸模属植物根及3个不同产地羊蹄根中酸模素的含量进行了测定，不同基原的“羊蹄类药材”中酸模素含量存在较大差异，5种药材中羊蹄的酸模素含量最高，可达0.13％以上，金不换和齿果酸模次之，具有作为抗真菌药的开发利用价值。

酸模素(Musizin)，又名羊蹄根素；分子式：C₁₃H₁₂O₃；分子量：216.23；为黄色针状结晶，mp.164℃-165℃。

药理研究表明酸模素具有抗菌、抗真菌作用。对深红色发癣菌、枯草杆菌、白色念珠菌和八迭球菌的最低抑菌浓度分别为：50，25，100，100μg/ml；可以作为抗氧化剂用于食品和化妆品；对睾丸激素还原酶有抑制作用；含有酸模素的牙粉制品可以预防和治疗牙龈炎和牙床的脓溢。中国专利申请号200610046584.1利用羊蹄根根部所含的大黄素、酸模素等成份，抑制、杀灭红色毛癣菌、及其它致病菌，达到治愈脚气病的目的。

文献报道了用硅胶柱层析方法得到酸模素的方法(郑水庆，等.中药羊蹄化学成分的研究(I).第二军医大学学报.2000，21(10)：910-913)，采用80％乙醇室温冷浸提取多次，减压浓缩，依次用二氯甲烷等多种溶剂萃取，在二氯甲烷的提取物经硅胶柱层析分离得到酸模素，该方法操作步骤繁琐，过程中损失大，回收率低。

高速逆流色谱(HSCCC)是国际上世纪80年代以来在液-液分配色谱基础上发展起来的新型分离技术，其分离原理是利用螺旋柱在高速行星运动时产生的巨大离心力，使螺旋柱中互不相溶的两相不断混合，达到稳定的流体动力学平衡态。该技术不采用固态吸附剂，是全液态的色谱方法。与其他的色谱技术相比，HSCCC是能够消除固体吸附剂所导致的样品不可逆吸附和对样品的沾染、失活、变性等影响，实现复杂混合物中各组分的高纯度分离。HSCCC的流动相、固定相为互不相溶的液体。利用螺旋管柱方向性及特定的高速流星式旋转所产生的离心场作用，使无载体支持的固定相稳定地保留在聚四氟乙烯管中，利用恒流泵连续输入流动相，随流动相进入螺旋柱的溶质再两相间持续分配，按分配系数大小依次洗脱。

高速逆流色谱作为一种新型的分离技术，有许多优点是传统液-固色谱无法比拟的，因而具有广阔的应用前景。首先，它的流动相和固定相均为液体，不需固体载体，避免了不可逆吸附；其次，它的分离率高，可达几千个理论塔板数；此外，它的进样量大，可从毫克到克量级。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是客服现有技术的缺点，采用高速逆流色谱法分离制备酸模素的方法。该方法得到的酸模素含量高达98％。

本发明的技术方案如下：

酸模素的分离制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)将羊蹄用二氯甲烷渗漉提取，回收溶剂，得粗提取干燥物；

2)选择两相溶剂体系，采用高速逆流色谱仪，将步骤1)中的粗提取物溶解于上相和下相的混合溶液中，再将固定相泵满色谱分离柱，连接柱首端与进样阀，收集分离物，浓缩、干燥得到酸模素。

所述步骤2)中的两相溶剂体系是石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水，体积比为(5-8)∶(7-10)∶(4-6)∶(2-4)，优选体积比为6∶8∶4∶2、8∶10∶6∶4、5∶8∶5∶2。

所述高速逆流色谱法所用分离柱转速为600-900rpm，优选650-800rpm。

所述高速逆流色谱法中流动相流速为0.5-3ml/min，优选为1.0-2.5ml/min。

本发明的有益效果：由于采用了合理的溶剂体系，控制温度、转速、流动相流速等条件，本发明可得到高纯度的酸模素。且该方法简单，适于各种型号的逆流色谱仪分离纯化酸模素，条件温和、回收率高，用时短。

具体实施方式：

下面结合实施例对本发明作进一步详细描述，但本发明的实施方式并不仅限于此。

实施例1：