[发明专利]一种曲霉半乳甘露聚糖单克隆抗体的制备及其产品

权利要求书

1.一种半乳甘露聚糖单克隆抗体制备，其是首先利用乙醇沉淀、离子交换层析、分子筛层析等方法从烟曲霉的发酵物中提取半乳甘露聚糖抗原，接着免疫小鼠，制备单克隆抗体YR1和YR2，为IgM免疫球蛋白，活度常数分别为1×10¹⁰、1×10⁹。使用YR2为酶标抗体，YR1为捕获抗体，可以制备成试剂盒，用来检测血清中的侵袭性曲霉，作为临床诊断的参考之一。

2.如权利要求1所述的烟曲霉来源为中国医学科学院皮肤病研究所。

3.如权利要求1所述的半乳甘露聚糖纯化的步骤为为乙醇沉淀，透析，离子交换层析，分子筛层析。

4.如权利要求3所述的所用无水乙醇浓度为50％，4℃静置过夜。

5.如权利要求3所述的半乳甘露聚糖纯化的第二步为离子交换层析，采用DEAE-52凝胶，缓冲溶液为双蒸水，洗脱液为0.1M NaCl溶液，洗脱时间为30分钟左右。

6.如权利要求3所述的半乳甘露聚糖的第三步为分子筛层析，采用TSK G2000蛋白柱，示差折光检测器，PBS缓冲溶液，收集49min左右出的峰。

7.如权利要求1所述的制备的半乳甘露聚糖单克隆抗体YR1和YR2，对酵母来源的乳糖，大肠杆菌的脂多糖均不发生特异性反应，而对半乳甘露聚糖抗原具有良好的特异性，其活度常数分别为1×10¹⁰、1×10⁹。

8.如权利要求1所述的使用YR1和YR2来制备曲霉半乳甘露聚糖检测试剂盒，应用于临床诊断领域，并采用阈值质控法。