[发明专利]一种利用超滤技术从牡蛎中提取天然牛磺酸的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及到一种海洋海洋活性物质及其提取方法，属食品科学技术领域。

背景技术：

牡蛎属双壳贝类，牡蛎肉含有丰富的蛋白质、氨基酸、糖原及微量元素，是一种营养价值极高的海产品。研究表明，牡蛎具有多种生物活性，如提高机体免疫力、抗疲劳、抗肿瘤、保护肝脏等作用，因此人们开始研究从牡蛎中提取功能物质的方法。在现有技术中，公开号为1313403，专利号为01109816.3的中国专利申请公开了一种名为“天然牛磺酸生产工艺”的专利文献，其工艺为以珍珠贝壳为原料，利用蛋白酶、胰酶，食用乳酸、NaoH为辅料，进行酶解生产富含钙、天然氨基酸、微量元素的牛磺酸复合物。公开号为100999743，专利号为200710006670.2的中国专利申请公开了一种名为“一种从牡蛎中提取天然牛磺酸的方法”的专利文献，其工艺为将牡蛎肉制备成浆液、超声波-酶解破碎15～20min、灭酶过滤、浓缩、利用5％的三氯乙酸进行一级分离，之后再利用6％的CTAB进行二级分离、分离液利用活性炭处理、树脂吸附纯化、乙醇沉淀和结晶和干燥最终得到牛磺酸晶体。广西大学生命科学与技术学院的粟桂娇在食品科学2005年9期上发表的“车螺肉酶解中提取分离天然牛磺酸工艺”一文中介绍了牛磺酸的提取方法，利用酸性蛋白酶及水解提取牛磺酸，并用Hcl、NaOH沉淀酸+碱蛋白，H+离子交换树脂进行分离纯化，乙醇沉淀，最后得到牛磺酸晶体。

上述方法的缺陷在于：1.在酶解后沉淀蛋白的过程中引入了其他杂质离子，为之后的离子分离；2.采用胰酶、酸性蛋白酶都用酸或碱调节pH值，即操作复杂，又引入了杂质离子。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是提出一种利用超滤技术从牡蛎中提取天然牛磺酸的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的。本发明是一种利用超滤技术从牡蛎中提取天然牛磺酸的方法，其特点是，

(1)原料匀浆，将清洗过的牡蛎肉放入组织搅碎机中搅成糊状，然后按照固液比为1∶9添加去离子水；

(2)酶解，将上述匀浆液的温度控制在45℃，在所述的匀浆液中加入中性蛋白酶，所述的中性蛋白酶的添加量应在1200u/g，然后保温酶解上述匀浆液，处理时间为6h；

(3)灭酶离心，酶解完成后，将所述酶解液的温度提高到100℃，保持10min后，用6000r/min的离心机离心15min；

(4)减压浓缩，将上述酶解液放到旋转蒸发仪上进行浓缩，浓缩到原体积的1/60，得到浓缩液。

(5)超滤去除蛋白，将上述酶解液通过10000U的超滤膜，得到蛋白质的分子量低于10000U的酶解液，然后将所述的酶解液通过1000U的超滤膜，进行第二次超滤，得到蛋白质的分子量低于1000U的酶解液。

(6)树脂的吸附纯化，用离子交换吸附法吸附色素和杂质纯化所述的超滤酶解液，得到牛磺酸粗提液；

(7)醇沉，将所述的牛磺酸粗提液中加入4倍体积的无水乙醇，之后将所述的牛磺酸粗提液置于4℃冰箱中过夜，得到牛磺酸沉淀物；

(8)结晶，将所述牛磺酸沉淀物适量溶于水，再放入4倍体积的无水乙醇，既有牛磺酸针状晶体析出，反复操作，纯度提高。

本发明的有益效果是，1.采用超滤法去除酶解液中的蛋白，与传统方法相比减少了杂离子的引入；2.由于匀浆液的pH值接近中性，采用中性蛋白酶酶解，可以不用调节pH，操作简单。

具体实施方式：

实施例一。一种利用超滤技术从牡蛎中提取天然牛磺酸的方法。

(1)原料匀浆，将清洗过的牡蛎肉放入组织搅碎机中搅成糊状，然后按照固液比为1∶9添加去离子水；

(2)酶解，将所述匀浆液的温度控制在45℃，在所述的匀浆液中加入中性蛋白酶，所述的中性蛋白酶的添加量应在1200u/g，然后保温酶解上述匀浆液，处理时间为6h；

(3)灭酶离心，酶解完成后，将所述酶解液的温度提高到100℃，保持10min后，用6000r/min的离心机离心15min；

(4)减压浓缩，将上述酶解液放到旋转蒸发仪上进行浓缩，浓缩到原体积的1/60，得到浓缩液。

(5)超滤去除蛋白，将上述酶解液通过10000U的超滤膜，得到蛋白质的分子量低于10000U的酶解液，然后将所述的酶解液通过1000U的超滤膜，进行第二次超滤，得到蛋白质的分子量低于1000U的酶解液。

(6)树脂的吸附纯化，用离子交换吸附法吸附色素和杂质纯化所述的超滤酶解液，得到牛磺酸粗提液；