[发明专利]人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法

说明书

[技术领域]

本发明涉及注射液的制备方法，尤其涉及一种人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法。

[背景技术]

肝纤维化是继发于各种原因引起的肝脏炎症或损伤后组织修复过程的代偿反应，是细胞外基质在肝内过渡沉积的病理改变的结果，也是慢性肝病发展为肝硬化的重要中间环节。目前这个阶段的肝脏病变是可逆转的，但若没有得到及时有效的治疗，则最终往往导致肝硬化、上消化道出血、肝腹水、肝癌和肝功能衰竭等，是引起人类死亡的主要原因之一，因而逆转或延缓肝纤维化过程是肝病治疗的一个重要环节。引起肝纤维化的病因很多，在国内以病毒性肝炎，尤其是慢性乙型和丙型肝炎所致的肝纤维化最为常见。在我国，乙型肝炎病毒表面抗原的检出率约为10％，其中慢性无症状乙型肝炎病毒感染者或慢性无症状HBV携带者就超过1.3亿，现慢性乙肝患者约3000万人。慢性感染患者中40％可能发生肝硬化或者肝癌，是正常人群的100-200倍。在国外，特别是北美、西欧则以酒精性肝纤维化为最多。此外某些遗传和代谢疾病、化学毒物或药物损伤、血吸虫感染、各种原因导致的肝脏淤血、胆汁淤积、自身免疫性肝病都可以出现肝纤维化。

因此，肝纤维化的治疗成为现今人们关注的焦点。如何有效地防治肝纤维化，阻断其进展，对改善慢性肝病的预后有重要的意义，不仅为国家节省大量的资源，还促进了社会更加和谐发展。然而，现代医学并无治疗肝纤维化的特异性药物，多采用休息、加强营养、补充维生素等对症治疗方式，严重者需被迫停止用药，以免加重肝纤维化。尽管中医药对肝纤维化有一定的促再生和修复作用，但效果仍不是十分理想。

目前也有利用干细胞移植的方法治疗肝纤维化，但多采用骨髓间充质干细胞，细胞来源有限。且输注前细胞处理过程比较简单，不能保证使用过程中细胞的稳定性，不能较长时间保持细胞活性，因此不适于远距离运输。且间充质干细胞表面表达多种黏附分子，主要参与细胞-细胞，细胞-基质之间的特异性粘连过程，影响细胞迁移。因此，在干细胞输注过程中极易促使细胞聚集成团，形成细胞栓，增加了间充质干细胞临床治疗的危险性。对此问题，目前尚无极好的解决办法。

本发明采用人脐带组织分离出来的间充质干细胞，加入肝素钙、人血白蛋白、勃脉力A，制备成注射液形式。稳定性高，较好的解决了细胞聚集成团的问题，增加了注射液保存及运输过程稳定性、提高了临床使用安全性，进而更好的保持了注射液的疗效，为临床使用干细胞开辟了新的道路。

[发明内容]

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液及其制备方法，其具有稳定性高、疗效好、安全性高、便于储存和运输，适应临床大规模使用，应用前景广阔的特点，本发明可为肝纤维化患者带来福音，为临床上干细胞的使用开辟了新的道路。

本发明提供的人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液，由10％-50％人血白蛋白原液、49.5％89.50％的勃脉力A液和0.5％肝素钙组成，其中所述人血白蛋白原液的浓度为10％，1ml注射液中含有人脐带间充质干细胞6×10⁵-7×10⁵个。肝素钙是一种含有多糖类化合物，并具有防止细胞聚集成团功能的制剂。

所述注射液由20％人血白蛋白原液和79.5％勃脉力A液以及0.5％肝素钙组成，其中该注射液中的人脐带间充质干细胞的浓度为6.8×10⁵个/ml。

所述注射液使用静脉输注方式，按照人脐带间充质干细胞0.5×10⁶-1×10⁶个细胞/公斤体重注入患者体内。

本发明又提供的人脐带间充质干细胞抗肝纤维化注射液的制备方法，包括：提供间充质干细胞保存液，预冷、备用，所述的间充质干细胞保存液包括人血白蛋白原液、勃脉力A液和肝素钙；提供人脐带间充质干细胞；将获得的人脐带间充质干细胞加入到间充质干细胞保存液中；通过重悬的方式，调整加入到间充质干细胞保存液中的人脐带间充质干细胞数量为6×10⁵-7×10⁵个细胞/1ml。

所述间充质干细胞保存液是由10％-50％的浓度为10％的人血白蛋白原液49.50％-89.5％勃脉力A液、0.5％肝素钙混匀组成。

所述间充质干细胞保存液由20％人血白蛋白原液和79.5％勃脉力A液、0.5％肝素钙组成。