[发明专利]飞秒激光诱变米根霉选育富马酸高产菌株的方法无效
| 申请号： | 201010551640.3 | 申请日： | 2010-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN102061294A | 公开（公告）日： | 2011-05-18 |
| 发明（设计）人： | 闻建平;于守智 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N13/00 | 分类号： | C12N13/00;C12N1/14;C12R1/845 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 王丽 |
| 地址： | 300072 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 激光 诱变 米根霉 选育 富马酸 高产 菌株 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种飞秒激光诱变米根霉选育富马酸高产菌株的方法，其特征是步骤如下：
1)将米根霉(ATCC 20344)，在室温下，制备104～106个孢子/mL的孢子悬液；
2)采用波长为800nm、重复频率为76MHZ的飞秒激光，在照射功率为5～40mW、照射距离6em、激光束直径6mm下，对该孢子悬液辐照5～30s；
3)涂布平板培养，摇瓶筛选高产菌株。
2.如权利要求1的方法，其特征是：所述的涂布平板培养的方法是：把经辐照处理的孢子悬液经无菌用去离子水稀释100～10000倍后涂布于PDA培养基平板，35℃暗室培养至出现单菌落，再将每个单菌落分别挑取至一个PDA培养基平板中，用无菌去离子水洗下孢子接种于盛有40mL液体发酵培养基的250mL摇瓶，于33～35℃，180～220rpm摇床中培养60～84h，从而获得诱变的遗传性状稳定的纯种米根霉菌株。
3.如权利要求2所述的方法，其特征是所述的液体发酵培养基组成及质量含量为：葡萄糖80g、尿素0.1g、KH2PO40.5g、MgSO4·7H2O 0.6g、ZnSO4·7H2O 0.018g、FeSO4·7H2O 0.001、CaCO355g，溶解在1L蒸馏水中，初始PH为5.5。
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