[发明专利]一串红植株的再生方法无效
| 申请号: | 201010542734.4 | 申请日: | 2010-11-11 |
| 公开(公告)号: | CN102090333A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
| 发明(设计)人: | 刘辉;张国平;沈国正;傅巧娟;陈一;方献平 | 申请(专利权)人: | 浙江大学;杭州市农业科学研究院 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
| 地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一串 植株 再生 方法 | ||
1.一串红植株的再生方法,其特征是依次包括以下步骤:
1)、一串红种子消毒:
2)、无菌培养:
将消毒后的一串红种子接种在MS固体基本培养基上进行无菌培养22~26h,培养条件:25±1℃,暗培养;
3)、愈伤组织的诱导:
将无菌培养后所得的种子纵切成两半,然后去掉种皮后切面朝下接种于诱导愈伤培养基上培养15~20天,培养条件:25±1℃,暗培养;
4)、愈伤组织继代1~2次:
将步骤3)所得诱导后产物接种在诱导愈伤培养基上继代1~2次,每次15~20天,培养条件:25±1℃,弱光培养,光照强度为50-100mol m-2·s-1;得继代后愈伤组织;
5)、愈伤组织的分化
选取步骤4)所得的生长良好的继代后愈伤组织转接到分化培养基上进行不定芽的分化,直至长出3~5cm的不定芽;培养条件:25±1℃,需光培养,光照强度为200~300mol m-2·s-1;
6)、再生苗的生根培养:
割取步骤5)所得的不定芽作为小苗转接到生根培养基上进行生根培养;直至小苗上长出至少3条且长度≥2cm的不定根;得到可出瓶移栽的种苗;培养条件:25±1℃,需光培养,光照强度200~300mol m-2·s-1;
上述步骤1)~步骤6)均在无菌环境中进行。
2.根据权利要求1所述的一串红植株的再生方法,其特征是:
所述MS固体基本培养基为:MS基本培养基+琼脂6~8g/L+蔗糖28~32g/L;pH值为5.7~5.9;
所述诱导愈伤培养基为:1/2MS基本培养基+琼脂6~8g/L+蔗糖28~32g/L+6-BA 0.8~1.2mg/L+2,4-D 1.8~2.2mg/L+水解酪蛋白0.4~0.6g/L+脯氨酸0.4~0.6g/L,pH值为5.7~5.9;
所述分化培养基为:1/2MS基本培养基+琼脂6~8g/L+蔗糖28~32g/L+TDZ 1.8~2.2mg/L+KT 0.8~1.2mg/L+水解酪蛋白0.4~0.6g/L+脯氨酸0.4~0.6g/L,pH值为5.7~5.9;
所述生根培养基为:1/2MS固体培养基+琼脂6~8g/L+蔗糖28~32g/L+NAA 0.4~0.6mg/L,pH值为5.7~5.9。
3.根据权利要求2所述的一串红植株的再生方法,其特征是:所述步骤1)的消毒为:
在无菌操作台上,选取一串红优质种子放置于带有过滤网的球状壳体内,先用质量浓度75%酒精消毒1min,然后用无菌蒸溜水洗3次,再用质量浓度0.1% HgCl2溶液消毒8min,最后用无菌蒸溜水冲洗3次。
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