[发明专利]具有最高迁移效率的神经干细胞的制备方法及其应用无效
| 申请号: | 201010542423.8 | 申请日: | 2010-11-12 |
| 公开(公告)号: | CN101974487A | 公开(公告)日: | 2011-02-16 |
| 发明(设计)人: | 张焕相;贺丽虹;徐晓静 | 申请(专利权)人: | 苏州大学 |
| 主分类号: | C12N5/0797 | 分类号: | C12N5/0797;A61K35/12;A61P25/00;A61P9/00;A61P19/00;A61P21/00 |
| 代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 陶海锋 |
| 地址: | 215123 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 最高 迁移 效率 神经 干细胞 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种具有最高迁移效率的神经干细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
分离培养神经干细胞,诱导分化,在分化的不同时段收集细胞,得到处于不同分化状态的神经干细胞;
确定迁移区域趋化因子情况,所述趋化因子情况包括趋化因子的种类和浓度,分析计算步骤所得不同分化状态神经干细胞对该趋化因子情况作用下的迁移效率,找到迁移效率最高的神经干细胞的分化状态,由此即可制备得到对该迁移区域所需的具有最高迁移效率的神经干细胞。
2.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤所述迁移效率,是指细胞迁移起始点到终点的最短距离与细胞迁移总距离的比值,数值越大表明迁移的持续性越高,定向迁移至病灶部位的能力越强。
3.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤具体包括以下步骤:确定迁移区域趋化因子情况,所述趋化因子情况包括趋化因子的种类和浓度,在分化培养基中加入与迁移区域相同种类、相同浓度的趋化因子,诱导细胞迁移;对细胞的定向迁移效率进行分析,找到对迁移区域具有最高迁移效率的神经干细胞的分化状态,所述分化状态的神经干细胞即为该迁移区域所需的具有最高迁移效率的神经干细胞。
4.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤中制备处于不同的分化状态的神经干细胞的方法为:在完全培养液中培养3-6 d的神经干细胞,细胞汇合度达到50-90%左右时,吸掉完全培养液,更换为分化培养基,从更换分化培养基开始,不同时间段取样即得到不同分化状态的神经干细胞。
5.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述神经干细胞迁移效率的分析方法为:运用邓恩室,结合活细胞工作站对单个细胞的迁移行为进行追踪,分析神经干细胞迁移的具体轨迹,计算干细胞的迁移效率,即从细胞迁移起始点到终点的最短距离与细胞迁移总距离的比值。
6.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述趋化因子为诱导神经干细胞趋向性迁移的因子,包括所有能够引起不同分化状态的神经干细胞定向迁移的炎症趋化因子和细胞生长因子。
7.一种治疗神经系统疾病、运动系统疾病、心血管系统疾病的药物,其特征在于,所述药物包括:采用权利要求1所述制备方法所得的神经干细胞。
8.根据权利要求7所述药物,其特征在于,还包括趋化因子。
9.一种治疗神经系统疾病、运动系统疾病、心血管系统疾病的药物载体,其特征在于,所述药物载体包括:采用权利要求1所述制备方法所得的神经干细胞。
10.根据权利要求9所述药物载体,其特征在于,还包括趋化因子。
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