[发明专利]一种水产养殖用多菌种微生物复合制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种水产养殖用多菌种微生物复合制剂，其特征在于：它是由光合细菌（Rhodoplanes elegans）ACCC 10649、酵母菌（Pichia fermentans lodder）ACCC 20319^T、纳豆菌（Bacillus natto Swamura）ACCC 10614、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al）ACCC 10242^T、乳酸杆菌（Lactococcus lactis）ACCC 11092和双歧杆菌（Bifidobacterium sp）ACCC 11054分别进行单菌种培养得到的种子培养液接种于同一培养基中，然后进行发酵罐培养，待培养液的pH值自然降至3.0～3.5而得到的，该制剂中光合细菌（Rhodoplanes elegans）ACCC 10649的菌数≥5.0×10⁹cfu/ml，酵母菌（Pichia fermentans lodder）ACCC 20319^T的菌数≥0.1×10⁹cfu/ml，纳豆菌（Bacillus natto Swamura）ACCC 10614的菌数≥5.0×10⁹cfu/ml，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al）ACCC 10242^T的菌数≥5.0×10⁹cfu/ml，乳酸杆菌（Lactococcus lactis）ACCC 11092的菌数≥5.0×10⁹cfu/ml，双歧杆菌（Bifidobacterium sp）ACCC 11054的菌数≥5.0×10⁹cfu/ml。

2.根据权利要求1所述的水产养殖用多菌种微生物复合制剂，其特征在于：所述各菌种的种子培养液的重量百分数为：光合细菌的种子培养液 25%～35%，酵母菌的种子培养液 5%～15%，纳豆菌的种子培养液 15%～25%，枯草芽孢杆菌的种子培养液 15%～25%，乳酸杆菌的种子培养液 5%～15%，双歧杆菌的种子培养液 5%～15%。

3.根据权利要求1所述的水产养殖用多菌种微生物复合制剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）种子培养液的制备：

光合细菌（Rhodoplanes elegans）ACCC 10649的种子培养液的制备：将光合细菌（Rhodoplanes elegans）ACCC 10649在无菌条件下接种到液体培养基中，所述的液体培养基为：各组分在1.0L蒸馏水中的含量为：酵母粉3.0g、蛋白胨3.0g、七水硫酸镁0.05g、氯化钙0.3g，pH值调至6.08～7.0之间，放置于光培养箱内，28℃～30℃常规光照培养6～7天，得到光合细菌菌数≥5.0×10⁹cfu/ml的种子培养液；

酵母菌（Pichia fermentans lodder）ACCC 20319^T的种子培养液的制备：将酵母菌（Pichia fermentans lodder）ACCC 20319^T在无菌条件下接种到液体培养基中，所述的液体培养基为：各组分在1.0L蒸馏水中的含量为：无水硫酸镁1.0g、磷酸二氢钾2.0g、尿素3.0g、玉米浆1.0g、硫酸锰0.02g、硫酸亚铁0.2g，pH值调至5.5，30℃-31℃培养4～5天，得到酵母菌菌数≥0.1×10⁹cfu/ml的种子培养液；

纳豆菌（Bacillus natto Swamura）ACCC10614的种子培养液和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al）ACCC 10242^T的种子培养液的制备：将纳豆菌（Bacillus natto Swamura）ACCC 10614和枯草芽孢杆菌（Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al）ACCC 10242^T分别在无菌条件下接种于液体培养基中，所述的液体培养基均为：各组分在1.0L蒸馏水中的含量为：蛋白胨10.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g，pH值调至7.0，28℃～32℃，单菌种培养7～8天，分别得到纳豆菌菌数≥5.0×10⁹cfu/ml的纳豆菌种子培养液和枯草芽孢杆菌菌数≥5.0×10⁹cfu/ml的枯草芽孢杆菌种子培养液；

乳酸杆菌（Lactococcus lactis）ACCC 11092的种子培养液和双歧杆菌（Bifidobacterium sp）ACCC 11054的种子培养液的制备：将乳酸杆菌（Lactococcuslactis）ACCC 11092和双歧杆菌（Bifidobacterium sp）ACCC 11054分别在无菌条件下接种于液体培养基中，所述的液体培养基均为：各组分在1.0L蒸馏水中的含量为：番茄汁200.0ml、可溶性淀粉0.5g、蛋白胨15.0g、氯化钠5.0g、酵母粉6.0g、吐温80 1.0g、葡萄糖20.0g，pH值调至7.2，30℃～35℃单菌种培养2～3天，分别得到乳酸杆菌菌数≥5.0×10⁹cfu/ml的乳酸杆菌种子培养液和双歧杆菌菌数≥5.0×10⁹cfu/ml的双歧杆菌种子培养液；

（2）水产养殖用多菌种微生物复合制剂的制备：

分别将步骤（1）制备得到的光合细菌（Rhodoplanes elegans）ACCC 10649、酵母菌（Pichia fermentans lodder）ACCC 20319^T、纳豆菌（Bacillus natto Swamura）ACCC10614、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtills subsp. spizienii Nakamura et al）ACCC 10242^T、乳酸杆菌（Lactococcus lactis）ACCC 11092和双歧杆菌（Bifidobacterium sp）ACCC 11054的种子培养液按其重量百分数为：光合细菌的种子培养液25%～35%，酵母菌的种子培养液5%～15%，纳豆菌的种子培养液15%～25%，枯草芽孢杆菌的种子培养液15%～25%，乳酸杆菌的种子培养液5%～15%，双歧杆菌的种子培养液5%～15%，在无菌条件下分别接种到同一液体培养基中，接种量为液体培养基重量的1﹪～2﹪，所述的液体培养基中各组分在1.0L蒸馏水中的含量为：红糖50.0g、蜂蜜10.0g，在溶氧度为5﹪即发酵罐中氧气的体积与发酵液的体积比为5%的条件下，28℃～32℃密闭式静置培养7～15天，使pH值降到3.0-3.5而成。