[发明专利]新型完整蛋白质微捕集器的制备方法和应用无效
申请号: | 201010535540.1 | 申请日: | 2010-12-22 |
公开(公告)号: | CN102030816A | 公开(公告)日: | 2011-04-27 |
发明(设计)人: | 张祥民;关霞 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C07K1/16 | 分类号: | C07K1/16 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 张磊 |
地址: | 200433 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 完整 蛋白质 微捕集器 制备 方法 应用 | ||
1.一种完整蛋白质微捕集器的制备方法,其特征在于具体步骤如下:
(1) 采用氢氧化钠溶液分别浸泡C4,C8和C18反相色谱填料,超声处理,以活化表面封端的填料,增加固定相表面裸露的硅羟基数目;超声结束后,离心弃去上清液,加入去离子水洗涤填料,以除去表面的氢氧化钠溶液,离心弃去上清液,重复两次;将处理后的C4,C8和C18反相色谱填料烘干备用;
(2) 采用溶胶凝胶法制备高通透性,高机械强度的毛细管柱上塞子;
(3) 采用溶胶凝胶法制备完整蛋白质微捕集器
将步骤(1)所得处理后的C4,C8 或C18反相色谱填料悬浮于以甲基三乙氧基硅烷为前驱体的溶胶溶液中,得到悬浮液;所述前驱体溶胶配方如下: 30 μL 甲基三乙氧基硅烷,100 μL 二氯甲烷, 50 μL 三氟乙酸,5 μL 水;采用加压装置将所得悬浮液引入步骤(2)所得带有塞子的毛细管中适当长度后,用硅橡胶垫将毛细管塞子端堵住;悬浮液在毛细管柱内凝胶化1.8-2.2小时后, 将凝胶化后的毛细管柱放入烘箱中,95-105oC老化20-28h;老化过程中,采用小气流的氮气始终保持通气状态,以吹出多余凝胶,老化后,除去毛细管柱上塞子,所得即为微捕集器。
2.一种如权利要求1所述方法所得完整蛋白质微捕集器在完整蛋白质捕集除盐中的应用。
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