[发明专利]一种山荷叶素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种山荷叶素的制备方法，尤其是一种从植物中提取山荷叶素的制备方法。

背景技术

山荷叶素(Diphyllin)，分子式：C₂₁H₁₆O₇，分子量：380.353，CAS登录号：22055-22-7。主要存在于爵床科、小檗科、芸香科多种植物中，其中小檗科植物南方山荷叶Diphylleia sinensis L.的根及根茎中含量较高，且原料来源丰富。其分子式如下：

现代研究表明，山荷叶素具有抗病毒、细胞毒等多种活性，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。

小檗科植物南方山荷叶Diphylleia sinensis L.的根及根茎被作为中药窝儿七使用，具有清热解毒的功效。

现有技术中，尚没有适用于高纯度山荷叶素工业化大生产的制备工艺报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的山荷叶素的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

取南方山荷叶根及根茎，粉碎，加入其质量6-10倍量体积的70-90％乙醇加热回流1-3次，每次1-2小时，合并回流液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，用比例为10∶1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行3-6级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，通过大孔吸附树脂柱吸附，50-70％乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。

加热回流用乙醇的浓度优选为80％，用量优选为原料质量的8倍量体积。

加热回流的次数优选为2次，每次1.5小时。

逆流萃取的级数优选为5级。

大孔吸附树脂选自D101型、D102型、CD-180型大孔吸附树脂中的一种。

大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度优选为60％。

大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量优选为5倍量柱体积。

制备所得山荷叶素可采用下列方法检测：

试验例1HPLC法测定山荷叶素纯度

色谱条件

色谱柱：十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相：乙睛-甲醇-水-磷酸(8∶38∶54∶0.01)；流速：1.0mL/min；检测波长：215nm；柱温：30℃。

测定方法

精密称取山荷叶素2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μL，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。

采用本发明制备山荷叶素，利于大生产操作，能耗小，污染小。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取南方山荷叶根及根茎10Kg，粉碎，加入60L的70％乙醇加热回流1次，1小时，取回流液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，用比例为10∶1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行3级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，通过D101型大孔吸附树脂柱吸附，50％乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶山荷叶素8.4g，经HPLC检测，纯度为95.2％，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2

取南方山荷叶根及根茎10Kg，粉碎，加入100L的90％乙醇加热回流3次，每次2小时，合并回流液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，用比例为10∶1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行6级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，通过D102型大孔吸附树脂柱吸附，70％乙醇洗脱，收集8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶山荷叶素9.6g，经HPLC检测，纯度为94.2％，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例3

取南方山荷叶根及根茎10Kg，粉碎，加入80L的80％乙醇加热回流2次，每次1.5小时，合并回流液，滤过，减压回收乙醇并浓缩，用比例为10∶1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，通过CD-180型大孔吸附树脂柱吸附，60％乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入丙酮结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶山荷叶素8.8g，经HPLC检测，纯度为98.1％，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。