[发明专利]共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法有效
| 申请号： | 201010534375.8 | 申请日： | 2010-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN101988049A | 公开（公告）日： | 2011-03-23 |
| 发明（设计）人： | 钱莉;季明春;潘兴元;龚卫娟;田芳;段秋芳 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/12;C12N15/24;C12N15/85 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 小鼠 白细胞 15 rae 转基因 细胞 及其 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞，其特征在于，是能稳定共表达膜型IL-15和Rae-1ε蛋白的转基因细胞BaF3细胞。
2.制备权利要求1所述共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞的方法，其特征在于，是先利用PCR克隆小鼠Rae-1ε基因，然后利用重叠PCR将小鼠CD8α分子的信号肽序列、小鼠IL-15成熟肽编码序列和CD8α的跨膜区和胞内区的编码序列拼接起来，获得膜表达型IL-15的编码基因mb15；将Rae-1ε基因和mb15基因分别插入真核表达载体pVITRO2-mcs的两个多克隆位点中，构建成重组真核表达载体pV/mb15/RAE-1ε；再将pV/mb15/RAE-1ε用脂质体转染法转染BaF3细胞，通过潮霉素筛选以及FACS分选的方法，获得稳定共表达膜型IL-15和Rae-1ε蛋白的转基因细胞。
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