[发明专利]多价多糖或多糖蛋白混合物中各单价多糖含量的检测方法有效
| 申请号: | 201010534104.2 | 申请日: | 2010-11-02 |
| 公开(公告)号: | CN102053029A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
| 发明(设计)人: | 郑佳;刘刚;朱向国;杜琳 | 申请(专利权)人: | 北京绿竹生物制药有限公司 |
| 主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/34;G01N30/08;G01N30/14 |
| 代理公司: | 北京华科联合专利事务所 11130 | 代理人: | 王为 |
| 地址: | 100176 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 多糖 蛋白 混合物 单价 含量 检测 方法 | ||
1.多价多糖或多糖蛋白混合物中各单价多糖含量的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、将多糖降解为完整单糖,
步骤2、使用常规技术手段定量测定降解后的单糖的含量。
2.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,包括所有含有可检测的小分子化合物且小分子化合物在样品组成单位上以氧连接或者氮连接,连接在每个基团上,尤其是适用于性质极其近似的糖链混合物。
3.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,所述多糖,选自C群脑膜炎奈瑟球菌多糖、Y群脑膜炎奈瑟球菌多糖、W135群脑膜炎奈瑟球菌多糖或它们的混合物。
4.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,其中所述的将多糖降解为完整单糖,可以采用任何现有的已经知道的降解技术,如:水解,酸解等。
5.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,其中所述常规技术手段包括分光光度法、液相色谱法、气相色谱法、液质联用、气质联用、原子吸收等等各种检测单糖的检测手段。
6.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、将多糖或者多糖蛋白结合物中容易在酸水解过程中聚合的活性基团还原为相对稳定的基团的步骤,
步骤2、得到的产物必要时可以通过透析、纯化、脱盐柱、超滤膜包等方法除去其中的小分子物质。
步骤3、将多糖降解为完整单糖,
步骤4、使用常规技术手段定量测定降解后的单糖的含量。
7.根据权利要求6的检测方法,其特征在于,所述还原使用的还原剂包括硼氢化钠、硼氢化钾、四氢铝锂等以及能还原双键的一切还原剂。
8.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,还原剂加入量约相当于样品中糖类质量的3倍为最优。
9.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,水解,包括酸水解、碱水解等各种水解方法,最好采用稀酸,尤以1mol/L的硫酸为最优。
10.根据权利要求1的检测方法,其特征在于,水解温度控制在100度为最优,水解时间根据样品而定,以保证水解彻底为准。
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