[发明专利]一种全天麻胶囊指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

权利要求书

1.一种全天麻胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于：全天麻胶囊用乙醇溶液提取后浓缩，加乙腈水溶液溶解，以天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛和巴利森苷为对照品，照高效液相色谱法建立指纹图谱。

2.按照权利要求1所述全天麻胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于：全天麻胶囊用质量百分浓度为10～80％的乙醇溶液提取后浓缩至干品，干品加体积百分浓度为0.5～5％的乙腈水溶液溶解，以天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛和巴利森苷为对照品，对照品用体积百分浓度为0.5～5％的乙腈水溶液溶解，照高效液相色谱法建立指纹图谱。

3.按照权利要求1或2所述全天麻胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述高效液相色谱法的色谱条件为：Synergi 4u Hydro-RP 80A柱为色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为磷酸水溶液，梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温28～45℃，检测波长220～284nm。

4.按照权利要求3所述全天麻胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于：

（a）供试品溶液的制备：称取全天麻胶囊0.5～5.0g，精密加入质量百分浓度为10～80%的乙醇水溶液10～100ml，称定重量，加热回流提取0.5～5h，放冷，再称定重量，用相同浓度的乙醇溶液补足减失重量，摇匀，过滤，取续滤液浓缩至干品后加体积百分浓度为0.5～5%的乙腈水溶液溶解，定容至10ml，摇匀，微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；

（b）对照品溶液的配制：精密称取天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛和巴利森苷对照品各0.5～5mg置10ml量瓶中，加体积百分浓度为0.5～5%的乙腈水溶液溶解并定容至刻度，再精密吸取10～500μl置5ml量瓶中，用相同浓度的乙腈水溶液定容至刻度，微孔滤膜过滤，取续滤液作为对照品溶液；

（c）色谱条件：Synergi 4u Hydro-RP 80A柱为色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为质量百分浓度0.1％的磷酸水溶液，梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温30～40℃，检测波长265～275nm；

（d）测定：精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到全天麻胶囊的指纹图谱。

5.按照权利要求4所述全天麻胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于：

（a）供试品溶液的制备：精密称取全天麻胶囊1.0g，精密加入50%的乙醇溶液25ml，称定重量，加热回流提取3h，放冷再称定重量，用50%的乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，浓缩至干品后加2%乙腈溶液溶解并定容至10ml，摇匀，微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液；

（b）对照品溶液的配制：精密称取天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛和巴利森苷对照品各1mg置10ml量瓶中，2%乙腈溶液溶解并定容至刻度，再精密吸取100μl置5ml量瓶中，2%乙腈溶液定容至刻度，微孔滤膜过滤，取续滤液作为对照品溶液；

（c）色谱条件：Synergi 4u Hydro-RP 80A柱为色谱柱，流动相A为乙腈，流动相B为0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速1.0ml/min，柱温40℃，检测波长270nm；

（d）测定：精密吸取供试品溶液5～40μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到全天麻胶囊的指纹图谱。

6.按照权利要求4或5所述全天麻胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于：步骤（a）和（b）中所述微孔滤膜过滤是用0.2μm的微孔滤膜过滤。