[发明专利]樱桃砧木组织培养基及培养基的改进方法

说明书

技术领域

本发明属于农业生物技术领域，涉及通过组织培养技术促进植物再生的方法，更具体的说是樱桃砧木组织培养基及培养基的改进方法。

背景技术

樱桃属于蔷薇科落叶乔木果树，成熟时颜色鲜红，玲珑剔透，味美形娇，树姿优美，富含糖和铁质，营养丰富，是重要的果树和园林绿化树，又具有很高的食用和药用价值，近年来在我国广泛栽培，发展潜力巨大。

目前樱桃的生产中主要采用扦插、压条和分根蘖繁殖，不但繁殖系数低，而且造成品种退化，病虫害传播蔓延。采用组织培养技术可以快速繁殖作物新品种，加快新品种的推广速度，同时植物组织培养培育的组培苗，遗传基因高度一致，生产稳定，苗木品质性能好，能为产业化生产提供优质的苗木。我国植物组织培养的研究从20世纪50年代开始，至今已有六七十年的历史，组织培养的发展进展快速，已有丰硕的研究成果，尤其近10多年来全国各地许多农业科研院所和高校都开展了植物组织培养研究工作，其发展更为迅速，研究范围涉及农作物、观赏植物、园艺作物、经济林木等上千种植物品种，植物茎尖培养脱病毒技术以及离体快繁技术也日趋成熟。但我国植物组织培养中仍然存在很多问题，其中经常出现的主要致命问题如组培苗的污染、褐化、玻璃化以及繁殖系数较低等，很多技术环节至今未能达到理想效果导致不能进行规模化生产，阻碍了我国组培脱毒苗木的规模化生产进程。

植物的组织培养是否成功，在很大程度上取决于培养基选用是否合适。培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地，而选择培养基更应该综合考虑植物组织不同材料以及不同生长阶段，根据植物生长需要配置最适合的培养基。培养基的产生最早是Sacks(1680)和Knop(1681)，他们根据植物从土中主要是吸收无机盐营养，设计出了由无机盐组成的Sacks和Knop溶液，至今仍在作为基本的无机盐培养基得到广泛应用。40年代White培养基用得较多。而到60和70年代则大多采用MS等高浓度培养基，可以保证培养材料对营养的需要，并能生长快、分化快。

目前，我国主要引进欧美樱桃品种及砧木，主要采用微茎尖技术、组织培养技术繁育具有生长优势的良种果树脱毒种苗，一般采用MS基本培养基，与其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高。MS基本培养基较高的无机盐浓度，对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响离子间的平衡。MS固体培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖及花药培养，它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。这种培养基中的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。

吉塞拉甜樱桃矮化砧木是目前在我国非常适用的樱桃砧木，其中吉塞拉5、6号是经实践证明适用于规模化生产的品种。吉塞拉5、6号甜樱桃矮化砧木由德国育成，为酸樱桃(Prunus cerasus)与灰毛叶樱桃(P.canesceus)进行种间杂交培育的三倍体杂种砧木，在西欧、北美应用广泛。该种砧木于1998年由美国引入我国，经过7年的区域试验和观察，发现吉塞拉5、6号与大多数品种亲和良好，具有明显的矮化、丰产、早实性强、抗病、抗盐、耐涝、土壤适应范围广、固地性能好、抗寒、产量高等优点。由于其为无性系砧木，不能采用种子繁殖。采用常规压条及硬枝扦插生根困难，当前，在我国主要采用的是组织培养方法繁育，但吉塞拉甜樱桃矮化砧木在组织培养过程中还存在褐变、玻璃化等致命问题，一再影响生产产量。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种樱桃砧木组织培养基我们通过一系列实验及实践操作，对现用樱桃培养基进行了改进，取得了很好的效果。

本发明的另一个目的在于一种樱桃砧木培养基的改进方法。为实现上述目的本发明公开如下的技术方案：

一种用于繁殖樱桃植株的组织培养基，其特征在于它是由初代培养、继代培养、壮苗培养、诱导生根培养四部分培养基组成，其原料组成如下：

优化MS基础母液2-60ML/L；

蔗糖25-45g/L；

琼脂6.5-7.0g/L；

6-苄氨基嘌呤0.4-0.6mg/L；

吲哚丁酸IBA 0.1-0.3mg/L；

V_C 0.061-0.067mg/L；

吲哚乙酸IAA 0.05-1.00mg/；

活性碳1000-1200mg/L；

其中优化MS基础母液是由下述单位：g/L的原料组成