[发明专利]与植物耐逆性相关蛋白ZmFBL2及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种与植物耐逆性相关蛋白ZmFBL2及其编码基因与应用。

背景技术

全世界有3.8亿公顷盐碱土地。在我国耕地中有10％为盐渍化土壤，严重影响着现代农业的发展。在人口不断增长的今天，扩大可耕种土地面积，提高耕地单位面积产量以解决粮食问题已经成为亟待解决的问题。与利用工程手段改变环境以适应植物的需要相比，运用生物手段改变植物本身，使之适应环境是更为积极主动且长期有效的措施。因此，植物基因工程研究已经成为改良作物、提高产量的重要手段，因而克隆获得抗盐性较好的基因已经成为植物基因工程研究的重心。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种与植物耐逆性相关蛋白ZmFBL2及其编码基因。

本发明所提供的蛋白质，名称为ZmFBL2，人工合成，是如下1)或2)的蛋白质：

1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐逆性相关的由1)衍生的蛋白质。

上述序列表中序列2由368个氨基酸残基组成。所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述与植物耐逆性相关的蛋白的编码基因也属于本发明的保护范围。

所述编码基因为如下1)或2)或3)或4)所示的基因：

1)序列表中序列1所示的DNA分子；

2)序列表中序列1自5’末端第64-1170位核苷酸所示的DNA分子；

3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA分子杂交且编码所述与植物耐逆性相关蛋白质的DNA分子；

4)与1)或2)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码所述与植物耐逆性相关蛋白质的DNA分子。

其中，序列表中序列1由1229位脱氧核糖核苷酸组成，其开放阅读框架(ORF)为自5′末端第64-1170位碱基。

所述严格条件也可为在6×SSC，0.5％SDS的溶液中，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

含有上述蛋白编码基因的重组表达载体、重组菌、转基因细胞系或表达盒也属于本发明的保护范围。

所述重组表达载体具体为在pCAMBIA3301的Bgl II和Pml I位点间插入所述编码基因得到的pCAMBIA3301-ZmFBL2。

扩增上述任一所述编码基因全长或其任意片段的引物对也属于本发明的保护范围。引物对中的一条引物为序列表中序列3所示的DNA分子，另一条引物为序列表中序列4所示的DNA分子。

本发明的另一个目的是提供培育耐逆性提高的转基因植物的方法。

本发明所提供的方法，是将所述的编码基因导入目的植物得到的转基因植物，所述转基因植物的耐逆性高于所述目的植物。

所述耐逆性为耐盐性。

所述编码基因是通过所述重组表达载体导入所述目的植物中。

所述植物为双子叶植物或单子叶植物，所述双子叶植物优选为拟南芥。

本发明的实验证明，用克隆的方法得到ZmFBL2基因，将其导入拟南芥中得到的转基因拟南芥，与野生型拟南芥相比，转基因拟南芥的耐逆性高于野生型拟南芥，耐逆性表现在耐盐性。本实验得到的ZmFBL2基因和转基因拟南芥在植物遗传育种方面有重要的意义。

附图说明

图1为重组质粒表达载体

图2为菌液PCR鉴定转化pCAMBIA3301-ZmFBL2的GV3101阳性克隆

图3为T3代拟南芥过表达株系的PCR鉴定

图4为150mM NaCl条件下野生型拟南芥及过表达株系存活情况

图5为150mM NaCl条件下野生型拟南芥及过表达株系的存活率

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1、ZmFBL2的获得