[发明专利]一种R-多糖发酵液的制备及其复合防腐剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种发酵液的制备及其复合防腐剂的制备方法。

背景技术

R-多糖是天然食品防腐剂，其杀菌抑菌能力广泛，效果很好，抑菌机理是建立了酶生物合成和活性调节模式，在微生物的细胞膜上形成微孔，导致膜通透性增加和能量系统破坏，因而能迅速地杀灭食品中的微生物，并对食品中的少量微生物进行抑制，避免其繁殖，从而达到防腐保鲜的目的。

目前，R-多糖的制备工艺复杂，生产中需要经过大量排污反应处理等工艺技术，且常使用化学合成原料，易产生异味；其防腐剂的制备存在生产成本高（高达20000元/吨），产量低，即以投资额为定量生产核算，投资1000万元，仅可建10000吨/年的生产线。

发明内容

本发明是为了解决现有R-多糖的制备工艺复杂，其防腐剂的制备存在生产成本高和产量低的问题，而提供一种R-多糖发酵液的制备及其复合防腐剂的制备方法。

R-多糖发酵液的制备方法按以下步骤进行：一、将枯草芽孢杆菌、嗜热链球菌和啤酒酵母按5%的接种量分别接种于培养基中，在30℃恒温培养箱中进行培养48h，得三种菌的活化菌株，分别离心后收集三种菌体，然后采用灭菌的磷酸盐缓冲液洗涤3次；二、将洗涤后的三种菌体按菌体数量比1∶1∶1进行混合，然后接种于装有发酵培养基的发酵罐中，在发酵温度为30±1℃、摇床速度为120r/min的条件下发酵48h，得发酵液；三、发酵液进行提纯后，即完成R-多糖发酵液的制备。

制备R-多糖发酵液复合防腐剂的方法按以下步骤进行：一、按体积百分比将1.5%的乳酸链球菌素、1.45%的纳他霉素、4.5%的丙酸、6.2%的竹叶抗氧化物、3.35%的壳聚糖、3.5%的EDTA、0.5%的纤维素、0.8%的乙醇、0.4%山梨糖醇和77.8%的富氧活性水混合，得到混合液；二、按体积百分比将75%的混合液和25%的R-多糖发酵液混合，在55℃下反应1.5h，即完成R-多糖发酵液复合防腐剂的制备。

本发明中R-多糖发酵液采用枯草芽孢杆菌、嗜热链球菌和啤酒酵母综合培养再混合发酵制成，工艺简单，不需要经过大量排污反应处理等工艺技术，在生产过程中无化学合成原料，在发酵过程中有少量培养基残留物，残留量为成品的0.75%（即100公斤发酵液，有0.75公斤残留物）；在生物多溶生产过程中不产生三废、不排污、无异味，各种生产罐均为封闭式低温发酵和配置，卫生环境整洁，室内空气无污染源，清洗罐用水回收，排放为零。

本发明R-多糖发酵液为橙黄色液体，略带竹叶清香味，在pH值为3～8，可经180℃/5min 灭菌而不失效，溶于水、乙醇、硫酸等，在油脂中添加1%，充分搅拌均匀，完全溶解不分离，在食用后易被消化道中的蛋白溶菌酶分解成碳水化合物，因此其食用安全性很高；同时对黑曲霉、桔青霉、酿酒酵母、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等受试菌，R-多糖的抑菌效果普遍高于山梨酸钾，尤其是对引起食品腐败的酵母菌、霉菌、细菌作用最强，其抑制霉菌的有效浓度为0.005～0.1%，一般常用量为0.1～0.2%，抑制细菌的有效浓度为0.001～0.1%。

本发明中R-多糖发酵液制备成复合防腐剂，生产成本为15000元/吨，市场销售价为40000元/吨，市场利润空间大；产量高，以投资额为定量生产核算，投资1000万元可建20000吨/年的生产线；实用功效好，在食品中添加同样剂量比化学防腐剂苯甲酸钠有效保质期高12倍，比山梨酸钾有效保质期高8倍。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式R-多糖发酵液的制备方法按以下步骤进行：一、将枯草芽孢杆菌、嗜热链球菌和啤酒酵母按5%的接种量分别接种于培养基中，在30℃恒温培养箱中进行培养48h，得三种菌的活化菌株，分别离心后收集三种菌体，然后采用灭菌的磷酸盐缓冲液洗涤3次；二、将洗涤后的三种菌体按菌体数量比1∶1∶1进行混合，然后接种于装有发酵培养基的发酵罐中，在发酵温度为30±1℃、摇床速度为120r/min的条件下发酵48h，得发酵液；三、发酵液进行提纯后，即完成R-多糖发酵液的制备。

本实施方式所得R-多糖发酵液进行检测：

毒理：鄂疾控（2009）检字第06477号

1 . R-多糖发酵液，小鼠急性经口毒性试验MTD＞20ml/kg（BW）；

2 . 14d的观察期内，动物未见明显的急性中毒反应，亦无动物死亡，实验结束时处死动物，进行大体解剖，各脏器未见明显异常；