[发明专利]人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及肿瘤模型的建立方法，特别涉及人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立方法。

背景技术

结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病率在我国仅次于肺癌、胃癌、肝癌、食管癌，据2004-2005年全国城乡主要恶性肿瘤估计分析，结肠癌新发病例数达20万，死亡人数达10万，在美国结肠癌是第三大常见的肿瘤，2008年估计有149000新发病例，近50000人死于结肠癌。目前我国结、直肠癌的发病率与大部分恶性发病率逐年下降相反，每年新发病病例约增加2％。结肠癌的标化发病率迅速上升，与1972年比，2000年标化发病率男性增加134％，女性增加135％。

肿瘤模型是研究肿瘤的重要手段，肿瘤模型一般可分为自发性肿瘤模型、诱发性肿瘤模型、移植性肿瘤模型和转移性肿瘤模型。肿瘤实验研究中选用自发性肿瘤模型为对象进行研究有一定优点：首先是自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患的肿瘤更为相似，有利于将动物实验结果推用到人；其次是这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观察和统计分析发现原来没有发现的环境的或其它的致癌因素，可以着重观察遗传因素在肿瘤发生上的作用。但应用自发性肿瘤模型也存在一些缺点：肿瘤的发生情况可能参差不齐，不可能在短时间内获得大量肿瘤学材料，观察时间可能较长，实验耗费较大。Miwa等报道在三年观察3000例雄性Wistar大鼠中仅发现28例结肠癌。诱发性肿瘤大多采用致癌剂诱发肿瘤，常用二甲基肼(DMH)和氧化偶氮甲烷(AOM)，选择合适的致癌剂及适当的动物可以在短时间内获得一批合适的模型，适用于病因学的研究，但是模型所患肿瘤来源于动物，在基因上与人体存在一定的差异；诱发性肿瘤实验因环保问题需要防护设施，实验条件要求高。而移植性肿瘤一般由相应的细胞株建立起来，可供选择的细胞系或细胞株较多，这些细胞的生物学特性比较明确，背景资料比较清楚，动物接种一定数量的肿瘤细胞后，可以使一群动物带有同样的肿瘤，生长速率比较一致，个体差异较小，接种成活率较高，甚至可达100％，宿主的荷瘤寿命比较接近，易于客观地判断疗效，而且移植瘤可进行连续传代，模型重复性好，同自发性肿瘤和诱发性肿瘤相比，它的试验周期一般比较短。所以移植性肿瘤模型目前被广泛应用于肿瘤研究。转移性动物模型大多由移植性模型发展而来，再现了肿瘤的转移等生物学特性，用于肿瘤侵袭以及转移机理的研究。近年来，由于基因打靶技术和基因剔除技术的兴起，各种转基因动物得到广泛应用，但并未能建立单纯的自发和转移结肠癌模型。