[发明专利]一种保护霞水母毒素生物活性的方法无效
| 申请号： | 201010508895.1 | 申请日： | 2010-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN102002094A | 公开（公告）日： | 2011-04-06 |
| 发明（设计）人： | 李鹏程;李荣锋;于华华;冯金华;邢荣娥;刘松;秦玉坤;李克成;孟祥涛;崔金会 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C07K1/00 | 分类号： | C07K1/00;C07K1/14;C07K14/435 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 保护 水母 毒素 生物 活性 方法 | ||
1.一种保护霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：在霞水母毒素内添加金属酶抑制剂或酸性蛋白酶抑制剂，进而有效保护霞水母毒素生物活性。
2.按权利要求1所述的保护霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述在0.5-5mg/ml的霞水母毒素内添加终浓度0.1-20mM的金属酶抑制剂EDTA或终浓度2-6μg/mL的酸性蛋白酶抑制剂Pepstantin A，进而抑制毒素中蛋白酶的溶血活性。
3.按权利要求1或2所述的保护霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述霞水母毒素按如下步骤进行提取：
1)将冷冻于-80--20℃下的霞水母触角于0-8℃自溶2-96h，而后以0-8℃下5000-30000g离心5-30min，收集沉淀霞水母刺丝囊细胞，待用；
2)将上述每5-50mg的霞水母刺丝囊细胞内加入0.5-2mL在0-8℃预冷的10-30mM pH6.0-8.0缓冲液，然后在振动频率2500-5000rpm下破碎1-5min，其中每破碎10-30s将霞水母刺丝囊细胞取出置于冰水中冷却1-5min；
3)将破碎后霞水母刺丝囊细胞在0-8℃下，5000-30000g离心5-30min，上清液即为霞水母刺丝囊细胞毒素。
4.按权利要求3所述保护霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述步骤1)中自溶后用20-60目的标准分样筛滤去除触手残片。
5.按权利要求3所述保护霞水母毒素生物活性的方法，其特征在于：所述步骤2)中霞水母刺丝囊破碎时利用Mini-Beadbeater组织研磨器破碎；所述缓冲液为PBS缓冲液或Tris-HCl缓冲液。
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