[发明专利]一种纳米核酸导向药物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域；更具体地，本发明涉及一种纳米核酸导向药物及其制备方法和应用。

背景技术

近年来，分子靶向药物在肿瘤治疗中显示出其价值。本领域中，把针对细胞受体、基因、调控分子等信号转导为靶点的治疗，称为“靶向治疗”。

靶向治疗是肿瘤治疗的趋势，其毒副作用低于细胞毒性药物，所以尽管目前靶向药物疗效不甚明显，但也已经为肿瘤患者带来希望，为肿瘤治疗提供了新的思路与方法。

许多核酸药物目前在临床应用上最大的难题就是在体内易于被降解的问题，难以到达靶点部位，这是本领域难以克服的技术难题，大大限制了其临床应用。例如，大量的研究已经证明microRNA可以诱导癌细胞的凋亡，抑制癌细胞的生长，分裂。并且，microRNA是一种100％人源性的RNA，不会产生免疫反应，安全性好。然而，microRNA在进入到体内后易于被降解，大大降低了其临床应用效果。

目前，核酸药物治疗癌症大都处在研究阶段，单纯的寡核苷酸进入人体内，在很短的时间(几分钟至十几分钟就被体内血液核酸酶完全分解，无法有效到达病灶，由于分子量小，并且容易随经肾脏尿液排出，非特异性药物代谢，大大限制了核酸药物的效果。

C32是一种体内输送基因的聚合体，其颗粒大小在纳米级，毒副作用小。其可通过一种叫做内吞作用的过程进入细胞。然而，其在进入到体内后，受到体内环境的影响，易于发生膨胀，从而在未到达给药靶点前就释放出其包裹的药物。

因此，本领域迫切需要解决核酸药物的高效给药问题，使得药物尽可能多地到达需要用药的部位，不被体内其它机制降解。

发明内容

本发明的目的在于提供一种纳米核酸导向药物及其制备方法和应用。

在本发明的第一方面，提供一种纳米核酸导向药物，所述药物是C32粒子、导向物、核酸药物的复合物；

所述的复合物的表面修饰有聚乙二醇。

在一个优选例中，所述的聚乙二醇结合于复合物表面的氨基基团上。

在另一优选例中，所述的导向物是特异性靶向药物作用位点(如哺乳动物的组织、器官或细胞)的核酸或多肽。

在另一优选例中，所述的多肽选自：SEQ ID NO：11-14中的一种或几种。

在另一优选例中，所述的核酸药物是干扰分子。

在另一优选例中，所述的干扰分子选自：SEQ ID NO：1-10的寡核苷酸中的一种或几种。

在另一优选例中，所述的干扰分子是SEQ ID NO：1-10的寡核苷酸的混合物；更佳地，是SEQ ID NO：1-10的寡核苷酸等比例的混合物。

在另一优选例中，所述的纳米核酸导向药物是治疗肝癌的药物。

在另一优选例中，所述的纳米核酸导向药物的粒径的平均值约170±20纳米。

在本发明的另一方面，提供一种制备纳米核酸导向药物的方法，所述方法包括：

(1)将C32粒子、导向物、核酸药物混合，形成复合物；

(2)将(1)获得的复合物进行聚乙二醇修饰，获得纳米核酸导向药物。

在另一优选例中，所述的导向物是多肽，且步骤(1)包括：

(a)将C32与导向物进行酯化反应，形成C32-导向物复合物；以及

(b)将C32-导向物复合物与核酸药物混合，形成C32-导向物-核酸药物复合物。

在另一优选例中，步骤(a)中，C32与导向物的摩尔比是1∶(2-3)；较佳地是1∶2.4。

在另一优选例中，步骤(a)中，酯化反应的催化剂是SO₄^2-/SiO₂。

在另一优选例中，步骤(a)中，酯化反应的时间是4±2小时；较佳地是4±1小时。

在另一优选例中，聚乙二醇修饰的方法是：将C32-导向物-miRNA(较佳地溶于碳酸钠溶液)与过量的mPEG-SPA(较佳地溶于乙腈中)反应。

在本发明的另一方面，提供所述的纳米核酸导向药物的用途，用于制备靶向治疗疾病的组合物。

在本发明的另一方面，提供一种组合物，含有：

有效量的所述的纳米核酸导向药物；以及

药学上可接受的载体。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

附图说明

图1显示了利用透射电镜(TEM)对获得的药物的结构及大小进行鉴定。右图是对颗粒粒径的统计分析。