[发明专利]甲磺酸伊马替尼的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种甲磺酸伊马替尼的新用途。

背景技术

STI571又名Glivec，商品名为“甲磺酸伊马替尼”。目前国外主要用于慢性骨髓性白血病的治疗，STI571能明显抑制白血病细胞增殖，细胞阻滞于G0/G1期，且具有明显的诱导凋亡作用。

甲磺酸伊马替尼的化学名称为4-(4-甲基-1-哌嗪)甲基-N-4-甲基-3-4-(3-吡啶)-2-嘧啶氨基苯基-苯胺甲磺酸盐。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种甲磺酸伊马替尼的新用途。

本发明提供了甲磺酸伊马替尼在制备抑制神经元凋亡的产品中的应用。

本发明的另一个目的是提供一种甲磺酸伊马替尼在制备治疗神经退行性疾病和/或脑缺血疾病的产品中的应用。

所述抑制神经元凋亡是通过抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-1(MST1，serine/threonine-protein kinase)的磷酸化实现的。

所述抑制MST1的磷酸化是通过抑制非受体酪氨酸激酶(c-Ab1)的激酶活性实现的。

所述神经元凋亡为过氧化氢和/或鱼藤酮引起的神经元凋亡。

所述神经元为海马神经元，优选为鼠海马神经元，尤其优选为大鼠海马神经元。

所述产品为药物。

所述MST1的磷酸化为MST1433位点酪氨酸磷酸化。

甲磺酸伊马替尼(STI571)的化学名称为4-(4-甲基-1-哌嗪)甲基-N-4-甲基-3-4-(3-吡啶)-2-嘧啶氨基苯基-苯胺甲磺酸盐，分子式为C₂₉H₃₁N₇O·CH₄SO₃。

本发明的实验证明，STI571作为c-Abl(非受体酪氨酸激酶)特异性抑制剂，还可有效对抗神经细胞的氧化应激反应，抑制c-Abl的激酶活性，从而抑制神经细胞凋亡反应，因而，可能作为抗脑缺血及抗神经退行性疾病的候选新药，具有良好的应用前景，将极大程度拓展STI571的临床适应症。

附图说明

图1为STI571抑制H₂O₂诱导的原代海马神经元的凋亡反应

图2为STI571抑制c-Abl的激酶活性

图3为c-Abl介导了H₂O₂激活MST1引起的细胞凋亡

图4为c-Abl的RNAi质粒都能很好的敲除内源的c-Abl

图5为c-Abl在体外磷酸化MST1

图6为c-Ab在细胞内磷酸化MST1

图7为c-Abl在酪氨酸433位点磷酸化MST1

图8为抗体能特异性识别MST1酪氨酸433位点磷酸化

图9为c-Abl正向调节MST1的蛋白水平

图10为c-Abl激活MST1的激酶活性

图11为STI571可抑制H₂O₂诱导的MST1表达

图12为STI571可抑制H₂O₂诱导的MST1酪氨酸433位点磷酸化

图13为STI571可抑制鱼藤酮和H₂O₂诱导的MST1酪氨酸433位点磷酸化

图14为H₂O₂可在胞浆中激活MST1酪氨酸433位点磷酸化

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

以下实施例的细胞转染的方法均为(1)细胞培养：取6孔培养板，向每孔中加入2mL含1-2×10⁵个细胞培养液，37℃CO₂培养至40％-60％汇合时(汇合过分，转染后不利筛选细胞)。(2)转染液制备：在聚苯乙稀管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)A液：用不含血清培养基DMEM稀释2μg DNA，终量100μL，B液：用不含血清培养基稀释2μL lipofection2000，终量100μL，轻轻混合A、B液，室温中置15-20分钟。(3)转染：把A/B复合物均匀加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6-8小时，吸除培养基，换入新鲜培养液继续培养。

以下GFP荧光鉴定的均以GFP细胞为绿色作为阳性。