[发明专利]齐墩果酸的抗宫颈癌作用及其药物制剂

说明书

技术领域

本发明是涉及齐墩果酸（Oleanolic acid ）在抗宫颈癌方面的应用及其药物制剂，属于中药领域。

背景技术

齐墩果酸（Oleanolic acid ）是五环三萜类化合物，以游离体和配糖体的形式存在于多种植物中。主要提取来源木犀科植物齐墩果的叶，女贞果实；龙胆科植物青叶胆全草，川西獐牙菜；伞形科植物大星芹的叶、根；五加科植物楤木的根皮及茎皮；葫芦科植物大籽雪胆，可爱雪胆，中华雪胆的块根。

齐墩果酸已报道的药用作用主要有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿，还具有降血糖、降血脂、镇静等作用，是开发治疗肝病和降血糖等药物的有效成分。我们在筛选抗肿瘤药物过程中发现齐墩果酸具有较强的抑制宫颈癌细胞及其实体瘤生长的作用。

在本发明之前未见以齐墩果酸为原料研究药物剂型并用于预防和治疗宫颈癌疾病的报道。齐墩果酸是五环三萜类化合物，几乎无毒，中药资源极为丰富，是一种非常有前途的抗肿瘤药物。

齐墩果酸（Oleanolic acid ）的化 学 名：3β-hydroxy-olea-12-en-28-oic acid；分子式C₃₀H₄₈O₃；分子量：456.71。

化学结构式：

发明内容

本发明的目的之一是提供了齐墩果酸的药物制剂；

本发明的目的之二是提供了齐墩果酸的抗肿瘤新用途。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明的药物制剂含有1%-99%的齐墩果酸和99%-1%的赋形剂（包括其它配用的药物），优选含有20%-80%的齐墩果酸和80%-20%的赋形剂（包括其它配用的药物），最好含有60%-70%的齐墩果酸和40%-30%的赋形剂（包括其它配用的药物）。

按药剂学方法，可以将本发明的齐墩果酸制备成多种临床药物剂型作为抗宫颈癌药物，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所说的口服制剂选于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、微囊片剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种；所说的非肠道给药剂型选自于注射剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型当中的一种。

本发明的抗宫颈癌药物中的辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等。本发明的抗肿瘤药物中的其它配伍用的药物，指的是以有效剂量的齐墩果酸为一定的药物原料，再配伍其它已允许合用的中药或化学药品。

本发明的齐墩果酸药物制剂具有抗宫颈癌作用，是通过以下的药效学试验得到证实的。

试验例1 考察了齐墩果酸对体外宫颈癌细胞的抑制作用

细胞：人宫颈癌上皮细胞（Hela）。为中科院海洋所海洋药物实验室提供。

药品及试剂：齐墩果酸（Oleanolic acid ）中科院海洋所海洋药物实验室提供，白色粉末；5-氟脲嘧啶（5-FU）江苏南通精华制药有限公司产品，批号为100402； MTT（SIGMA，USA）；DMSO（SIGMA，USA）；胰蛋白酶（SIGMA，USA）；RPMI1640（GIBCO，Invitragen Co.，USA）；DMEM（GIBCO，Invitragen Co.，USA）；优级胎牛血清（GIBCO，Invitragen Co.，USA）；特级胎牛血清Fetal Bovine Serum（Hyclone）。

仪器：超低温冰箱（Nature，USA），细胞培养箱（SANYO，Japan），倒置显微镜（NIKON，Japan），酶标仪（Bio-Tek Instruments，Inooski，VT，USA），PH计（Thermo orion，USA），超净工作台（FLC-哈尔滨东联仪器厂）。

实验方法MTT法：将肿瘤细胞株按照常规方法培养传代，收集对数生长期细胞，调节细胞悬液浓度5×10⁴个/ml左右。将细胞悬液加入96孔培养板中，每个孔加入180 μl。置于37℃恒温培养箱中培养24 h后，实验组加入各浓度齐墩果酸（以5-FU作为阳性对照组）20μl/孔，每组各设4个平行孔，并设空白孔（只加入溶解药用的溶剂）以调零。在培养箱37℃，培养48 h后，用移液枪将96孔板中液体洗净后每孔加入MTT（1 mg/ml）30 μl，置CO₂培养箱37℃ 培养4 h，弃去上清，每孔加入DMSO 150 μl，置摇床摇匀30 min，用酶标仪在492 nm下检测，利用SPSS统计软件，计算细胞死亡率，求取IC₅₀。