[发明专利]受油污污染湿地的微生物修复方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种受油污污染湿地的微生物修复方法，特别是一种湿地土著嗜油菌群强化受油污污染湿地生态系统的原位微生物修复方法。

背景技术

石油的大规模开采、冶炼、运输、使用和处理过程中，污染、遗漏、井喷、输油管道泄漏等事故频发，导致严重的土壤污染。石油类污染物在水体表面形成油膜，致使水中溶氧量急剧下降，造成水生生物的大量死亡，破坏水生生态环境和渔业资源；还可进入地下水系，直接污染地下水源，影响居民用水和农田灌溉；石油中的一些致畸致癌物质还可通过食物链的生物富集作用而直接危害人类健康。石油烃种类多，分子结构稳定且构象复杂，毒性大，生物效应缓慢。而石油烃在环境中污染面广而分，不易集中治理。油污废水已经成为环保水处理领域的一项技术难题。目前，石油类污水的处理采用非生物方法和生物方法，非生物方法处理对于应急溢油污染事件效果好，但处理费用高，耗费人力财力。生化方法一直是水处理工艺中的首先方法，因石油类污染的特殊性，一般的传统活性污泥法，SBR法，生物滤池等，都不适用于会在水体表面形成油膜的油污水的处理，因此需要特殊的微生物。柴油在石油类污染中具有代表性。近年来，国内外已有嗜油菌处理含油污水的报道，而对于含高浓度柴油污水有高效降解率的微生物处理方法，还属于研究的薄弱环节。

利用自然界广泛存在的微生物对有机物很强的分解代谢能力对石油烃污染环境进行修复，具有其它方法不可替代的优势。大量的资料调研结果表明，石油烃污染物修复势在必行，生物修复不但可行，并且对环境造成的负面影响小。生物修复中微生物的作用占优势。因此获得优良的微生物，并研究其降解特性，对于成功实施环境修复十分重要。土著微生物相对于外源混合菌在石油污染土壤的生物修复中可以发挥更重要的作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种受油污污染湿地的微生物修复方法。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种受油污污染湿地的微生物修复方法，其特征在于该方法的具体步骤为：采集待修复的受油污污染湿地的土壤，用含有所受的油污的无机盐培养基进行土著嗜油菌的筛选，并扩大化培养筛选土著嗜油菌，将其以尿素浓度为4g/L，过磷酸钙浓度为1.5g/L的营养底物制成OD₆₀₀≈0.5的活性菌制剂，以掘孔倾倒的方式，按照每100kg土壤10L活性菌制剂的比例投入到油类污染的湿地土壤中。

上述的受油污污染湿地有：海洋、江河、湖泊岸带的受油污污染湿地。

上述的受油污污染为：受汽油、柴油、重油、原油或废弃油污排放带来的污染。

上述的受油污污染的土壤中油污的浓度为1000～20000mg/kg。

上述的土著嗜油菌的筛选为：在100ml含有100mg/L油污浓度的无机盐培养基中培养10g受油污污染的土壤，每天取样涂油污平板、分离菌种；再将该菌种加入到含有更高油污浓度的无机盐培养基中培养，分离菌种，如此反复至最终含油污的浓度为8460mg/L，筛选出最终菌种；将该最终筛选得到的菌种接种于富集培养基中，置于37℃、100～150r/min的摇床培养至对数生长期，离心收集菌体；重新悬浮于灭菌营养液中，制成OD₆₀₀≈0.5的活性菌制剂。

上述的含有所受的油污的无机盐培养基为：K₂HPO₄1g，KH₂PO₄1g，NaCl 0.5g，NH₄(SO₄)20.5g，MgSO₄0.2g，KNO₃0.2g，CaCl₂0.02g，NaCl 0.5g，FeCl₃痕量，微生素母液0.1ml，8.46～84.6g油污，蒸馏水1000ml，pH 7.5。

上述的富集培养基为：蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，氯化钠5g/L，油污42.3g/L，蒸馏水1000ml/L，pH 7.5。

上述的菌制剂营养底物为：尿素4g/L，过磷酸钙1.5g/L，蒸馏水1000ml/L，pH 7.5。