[发明专利]一种在水相中可高效分离柚皮苷的棒状印迹聚合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种在水相中高效分离柚皮苷的棒状高分子印迹聚合物的制备方法。

背景技术

柚皮苷(naringin，简称NG)是一种双氢黄酮类化合物，多种中成药的有效成分，具有抗氧化性(抑制氧化酶活性)、抗炎镇痛、抗病毒、抑菌及抑制眼醛糖还原酶等多种生物学活性和药理作用。黄酮类化合物具有抗氧化和促进氧化的双重作用。而柚皮苷是促进黄酮类化合物氧化作用最强的物质之一，对人体基因具有诱导毒害作用。因此，制备柚皮苷印迹聚合物对柚皮苷的分离提取及药物质量控制具有重要意义。

环糊精(CD)分子具有“内疏水，外亲水”独特的空间结构，使其对许多的分子，特别是药物分子具有包合作用，是一种很有潜力的合成药物类分子印迹聚合物的功能单体。但得到的粉体聚合物需经繁琐的研磨、筛分处理且在实际的应用过程中存在容易流失等缺点。本发明用六亚甲基二异氰酸酯(HMDI)作为交联剂，由于HMDI中的六亚甲基柔性很强，柚皮苷(NG)分子上的苯环有利于形成桥式的环糊精多聚体，同时对空间构型有控制作用，有利于印迹分子周围的聚合物稳定地结合印迹分子，提高棒状印迹聚合物(MIP)的选择性识别作用。去除印迹分子柚皮苷NG后，与印迹分子在大小和形状上相匹配的孔穴被留在环糊精的空穴中。

发明内容

本发明的目的在于提供在水相中高效分离柚皮苷的制备技术。

本发明的另一目的还在于提供一种制备棒状印迹聚合物(MIP)的方法。

本发明的目的是通过如下方案实现的：

1、将1g～10g的反应物功能体环糊精和0.10g～5g印迹聚合物的底物于30℃下溶于适量的含有10～30％有机溶剂的水溶液中，然后边搅拌边滴加5mL～10mL交联剂，10min～30min完成。

2、反应结束后，加入含0.3g～0.8g乳化剂的油相10g～30g，快速搅拌10～30min后升温至24℃～100℃，同时降低搅拌速度并恒速搅拌反应4h～10h得初产物。

3、将产物过滤并用甲醇、蒸镏水及丙酮依次进行充分洗涤，以除去各种杂质。最后，洗涤液用紫外光度计检测283nm处的NG吸收峰。洗涤结束后将产物真空干燥至恒重，得到棒状分子印迹环糊精聚合物。

本发明所述的反应物功能体环糊精是α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、羟丙基环糊精或羧甲基环糊精。

本发明所述的底物是柚皮苷、橙皮苷、柚皮苷二氢查尔酮或槲皮素。

本发明所述的交联剂为六亚甲基二异氰酸酯、甲苯二异氰酸酯、甲基二异氰酸酯、赖氨酸二异氰酸酯、环氧树脂、二元醛或异氰酸酯。

本发明所述的乳化剂为亲油型乳化剂司班20、司班40、司班60或司班80与亲水型乳化剂吐温20或吐温80混合而成，亲油型乳化剂∶亲水型乳化剂＝1∶3～10。

本发明所述的乳化剂还可以是阿拉伯胶、烷基苯磺酸钠、山梨酸醇脂肪酸酯类、磷脂类或糖脂类乳化剂。

本发明所述的有机溶剂的水溶液是含有10～30％的二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺或N，N-二甲基乙酰胺水溶液。

本发明所述的油相是液体石蜡、煤油或汽油，或他们任意比例的混合物。

本发明制备的棒状分子印迹环糊精聚合物具有较大的比表面积和孔体积，有利于底物和结合位点的接触，以提高负载量。其电子扫描电镜形貌观测图如下：其长度在5～20μm，半径为纳米级(＜1μm)，具有大的比表面积。

本发明以HMDI等作为交联剂，由于HMDI中的氰酸酯活性很高，极易与环糊精上的-OH基团反应形成聚合物。在特定结构分子如柚皮苷(NG)的参与下，其分子上的苯环有利于与CD形成桥式CD多聚体，同时对空间构型有控制作用，有利于印迹分子周围的聚合物稳定地结合印迹分子，提高RMIP的选择性识别作用。去除印迹分子NG后，与印迹分子在大小和形状上相匹配的孔穴被留在CD的空穴中。本发明涉及的以环糊精(CD)为功能体具有识别柚皮苷黄酮化合物的印迹作用，在水相中高效分离柚皮苷。