[发明专利]裸花紫珠制剂中毛蕊花糖苷含量的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及裸花紫珠制剂中有效成分含量的测定方法，尤其涉及裸花紫珠制剂中毛蕊花糖苷含量的测定方法。

背景技术

裸花紫珠(Callicarpanudiflorae)为马鞭草科小灌木植物，有止血、抗菌、收敛、解毒、镇痛、以及促进愈合的作用。其抗菌、抗病毒作用，尤其对金葡萄球菌、伤寒杆菌、肺炎双球菌等均有不同的抑制作用，其中对金葡萄球菌，伤寒杆菌抑菌作用最强。裸花紫珠还可抑制毛细血管的通透性，对早期的炎症渗出、肿胀有明显的抗炎性反应作用，同时可明显缩短出、凝血时间，止血效果显著。裸花紫珠的主要成分为黄酮甙、缩合鞣酸、中性树脂、酚类、多糖、羟基化合物及镁、钙、铁盐等，其中，紫珠萜酮、芹菜素、毛蕊花糖苷、木犀草素及其配糖体等黄酮类物质的含量约为5%。当以毛蕊花糖苷为指标探讨裸花紫珠浸膏的抗菌、抗炎和止血的药理效果时，实验结果表明，随着毛蕊花糖苷含量的升高，裸花紫珠浸膏的抑菌抗炎和止血作用都增强。

目前市场上裸花紫珠制剂主要有颗粒剂、胶囊、片剂、分散片、合剂、软胶囊、栓剂等，上述制剂的质量标准仅部分制剂进行了总黄酮的含量测定，测定方法为紫外分光光度法，定量很不准确，没有关于裸花紫珠制剂中毛蕊花糖苷的含量测定方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种能准确测定含量的裸花紫珠制剂中毛蕊花糖苷含量的测定方法。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的：

裸花紫珠制剂中毛蕊花糖苷含量的测定方法，采用高效液相色谱法测定裸花紫珠制剂供试品溶液中的毛蕊花糖苷含量，其特征是，色谱条件与系统适用性为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为有机溶剂–酸性溶液，流动相中有机溶剂的体积百分比为10-30%，酸性溶液的体积百分比为70-90%，酸性溶液浓度为0-0.3%，检测波长为322-345nm。

所述流动相中的有机溶剂包括甲醇或乙腈中的一种，甲醇和乙腈均为色谱纯；酸性溶液的酸包括醋酸或磷酸中的一种，醋酸和磷酸均为分析纯。

所述色谱条件与系统适用性试验的较优条件为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈–醋酸溶液为流动相，流动相中乙腈的重量百分比为16%，醋酸溶液的重量百分比为84%，醋酸溶液的浓度为0.1%，检测波长为332nm。

所述裸花紫珠制剂供试品溶液的制备方法是：取裸花紫珠制剂，相当于裸花紫珠浸膏0.05-1.5g，称定，置具塞三角瓶中，加入浓度为30-100%甲醇15-50ml，称定重量，在功率250w和频率33kHz下超声处理15-45分钟，放冷，再称定重量，加浓度为30-100%甲醇补足减少的重量，摇匀。滤过，取续滤液用0.45μm的微孔滤膜再次滤过，取续滤液，即得。

所述裸花紫珠颗粒供试品溶液的较优制备方法是：取裸花紫珠颗粒2袋，研细，取0.7g，相当于裸花紫珠浸膏0.187g，称定，置具塞三角瓶中，加入浓度为50%甲醇25ml，称定重量，在功率250w和频率33kHz下超声处理30分钟，放冷，再称定重量，加浓度为50%甲醇补足减少的重量，摇匀。滤过，取续滤液用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

所述裸花紫珠制剂为：以裸花紫珠为主药的单方制剂。

所述裸花紫珠制剂为：含有裸花紫珠的复方制剂。

所述裸花紫珠制剂为：含有裸花紫珠的固体制剂、液体制剂、外用制剂、软胶囊、滴丸、和注射液。

所述固体制剂为颗粒、胶囊、片剂、分散片、散剂、丸剂；液体制剂为合剂、口服液、糖浆剂；外用制剂为栓剂、软膏剂、乳膏剂。

本发明的有益效果是：能准确有效的测定裸花紫珠制剂中毛蕊花糖苷的含量，误差小，可进一步提高裸花紫珠制剂的质量标准，确保裸花紫珠制剂的质量和临床效果。

1.1色谱条件的选择  色谱柱：Dikma Diamonsil C18(2)柱，4.6mm×250mm，5μm，流动相：乙腈-浓度为0.1%的醋酸溶液（乙腈与醋酸溶液的体积百分比为16:84），流速：1ml/min，检测波长332nm，柱温：室温。在此条件下对照品、供试品在约15min相同时间有一色谱峰，见图1-图2。

1.2阴性对照试验  按处方取不含裸花紫珠药材的其他辅料，制成阴性对照样品，再按所述裸花紫珠制剂供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液，取阴性对照样品与阴性对照品溶液各10ml，注入液相色谱仪，结果在对照品毛蕊花糖苷色谱峰相应的位置上，无其它色谱峰出现，阴性对照对样品测定无干扰，结果见阴性对照色谱图3。