[发明专利]一种miRNA的抗病毒作用、实施方法及用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术和医学领域，具体地说，本发明涉及一种RNA小分子——miR-155的抗病毒作用、实施方法及用途。

背景技术

病毒是由一种以核酸(核糖核酸RNA或脱氧核糖核酸DNA)为核心，以蛋白质为外壳(衣壳，capsid)而组成的微小颗粒，其核酸可分为单股或双股、线形或球形。

病毒是最小的生物病原体，从20nm到300nm不等：其中最大的是痘类病毒，例如痘苗病毒为300nm×200nm，在普通光学显微镜下勉强可见；中等大小的病毒，如流行性感冒病毒，直径为80～100nm；小型病毒，如流行性乙型脑炎病毒，直径仅为20nm，必须在电子显微镜下才能见到【基础病毒学，莽克强等著，化学工业出版社，2005年第一版；分子病毒学，黄文林等著，人民卫生出版社，2001年第一版】。

随着病毒学和免疫学研究的进展，人们对病毒性疾病(Viral diseases)的认识也逐渐发展。最常用的病毒分类方式是根据核酸的性质(RNA或DNA)来对病毒进行分类，一般将病毒分为DNA病毒和RNA病毒。常见的致病性DNA病毒主要有：人乳头状瘤病毒(HPV)、乙肝病毒(HBV)、非洲淋巴细胞瘤(EB病毒)等，常见的致病性RNA病毒包括：流行性出血热病毒、人获得性免疫缺陷病毒(HIV)、严重急性呼吸综合征(SARS)病毒以及流感病毒等【基础病毒学，莽克强等著，化学工业出版社，2005年第一版；分子病毒学，黄文林等著，人民卫生出版社，2001年第一版】。病毒性疾病根据临床表现及传染方式，也可以分为呼吸道病毒、虫媒病毒、出疹性病毒、肠道病毒所致感染等。

病毒性疾病往往引起比较严重的临床表现，每每引起暴发流行。除了短期内因病毒感染而引起的局部炎症外，长期的病毒感染可以导致肿瘤以及器官功能衰竭等严重的疾病，例如：HPV感染引起的宫颈癌，HBV感染引起的肝癌、肝硬化和肝功能衰竭，EB病毒引起的鼻咽癌，HIV引起的免疫功能缺陷和卡波济氏肉瘤，SARS引起的呼吸功能衰竭以及流感病毒引起的呼吸功能障碍等【基础病毒学，莽克强等著，化学工业出版社，2005年第一版；分子病毒学，黄文林等著，人民卫生出版社，2001年第一版】。

我国是一个病毒性疾病高发的大国，如：我国HBV感染患者估计约有1.2亿，是世界上感染人数最多的HBV大国；不能忘记的是2002年SARS在我国的大流行。另外，HIV以及可能的流感病毒爆发也时刻威胁着国民的身体健康。

每一种流行性病毒感染都可以造成极大的人体健康危害和国民经济的损失。然而，本领域中至今对抗病毒尚无特效药，临床治疗重点就在对症和保守治疗，因此病毒性疾病的发病的分子和免疫学机理的研究和治疗策略的研究具有重大的科学意义和显示意义。

微小RNA(micro RNA，简称miRNA)是一类短序列、非编码、具有调控功能的单链小分子RNA，长约18～24nt。关于miRNA的最早报道是1993年Lee等报道的在秀丽线虫((C.elegants))体内发现的一种呈时间特异性表达的小分子RNA，即可调节线虫发育的lin4。2000年，Reinhart等又发现不同时期表达的let-7。到目前，公用miRNA数据库中已收录了三百多种人类miRNA序列，其中三分之二已被实验证实。

微小RNA来源于长度约为1000bp的长链RNA初始转录产物(Pri-miRNA)，Pri-miRNA分子在细胞核中经Drosha酶剪切形成长度约60～80nt的具有茎环结构的miRNA前体(Pre-miRNA)。miRNA前体转运至胞质后，被进一步加工成miRNA。

微小RNA在动植物细胞中通过对目标mRNA的切割和转录抑制发挥重要作用，参与细胞生长、组织分化和肿瘤形成等多种过程。miRNA在物种间具有高度的保守性、时续性和组织特异性。目前认为，miRNA在细胞凋亡、增殖、分化、血管生成及肿瘤形成等方面均具有重要的调节作用，参与人体大约30％的基因调节，与肿瘤、心血管疾病、肝病、免疫紊乱及代谢紊乱等多种发病有关。

从最初发现到现在，已经在哺乳动物中发现了700多种miRNA，其中绝大部分miRNA的生物学功能是未知的。已有报道，miRNA参与免疫应答中多方面的调控作用。但目前为止，尚未见报道miRNA能够调控或影响抗病毒天然免疫，也没有报道miRNA参与到对免疫细胞功能的调控作用。