[发明专利]一种检测农药残留的速测卡及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测农药残留的速测卡，包括：盖膜、第一塑料板、加样孔、酶片、塑料膜、第二塑料板和底物片；其特征在于，所述盖膜粘贴于第一塑料板的表面上；所述第一塑料板的表面上设有至少两个加样孔，加样孔的背面粘贴有固定了家蝇乙酰胆碱酯酶的酶片，所述酶片位置与加样孔相对；所述第二塑料板上设有与所述酶片位置相对应的粘贴有固定了乙酰靛酚的底物片；所述塑料膜置于第一、第二塑料板中间。

2.根据权利要求1所述的检测农药残留的速测卡，其特征在于，所述第一、第二塑料板面积相等。

3.根据权利要求1所述的检测农药残留的速测卡，其特征在于，所述各加样孔的间距为1-1.5cm。

4.根据权利要求1所述的检测农药残留的速测卡，其特征在于，所述酶片的直径大于加样孔的直径。

5.根据权利要求1所述的检测农药残留的速测卡，其特征在于，所述底物片的直径大于酶片的直径。

6.权利要求1所述的检测农药残留的速测卡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)酶片的制备：在0～4℃下，将乙酰胆碱酯酶、磷酸缓冲溶液、双功能试剂戊二醛、牛血清蛋白混合，加入直径稍小的醋酸纤维膜圆片，浸泡15～20min，然后取出，置于小型通风橱中阴干，即为酶片；

2)底物片的制备：在0～4℃下，将乙酰靛酚溶入乙醇或丙酮中，溶液浓度为400～800mg/L，然后，将直径稍大的醋酸纤维膜圆片放入该溶液中，浸泡15～20min，取出置于小型通风橱中阴干，即为底物片；

3)速测卡的制备：将塑料板分别制成两个面积相等的长方形；在第一塑料板上打至少两个加样孔，各孔间距为1～1.5cm；用明胶将上述酶片固定在该塑料板加样孔的背面，将上述底物片固定在第二塑料板上与酶片相对应的位置；再在第一塑料板表面贴一层盖膜，第一、第二塑料板中间贴一层塑料膜，即制得所述的检测农药残留的速测卡。

7.根据权利要求6所述的检测农药残留的速测卡的制备方法，其特征在于，步骤1)所述的乙酰胆碱酯酶是经过分子进化得到的基因工程酶。

8.根据权利要求6所述的检测农药残留的速测卡的制备方法，其特征在于，步骤1)所述的乙酰胆碱酯酶与醋酸纤维膜的比例为3～5U/片。

9.根据权利要求6所述的检测农药残留的速测卡的制备方法，其特征在于，步骤1)所述的双功能团试剂戊二醛与醋酸纤维膜的比例为0.2～0.5ul/片。

10.根据权利要求6所述的检测农药残留的速测卡的制备方法，其特征在于，步骤1)所述的牛血清蛋白与醋酸纤维膜的比例为1～3ul/片。

11.根据权利要求6所述的检测农药残留的速测卡的制备方法，其特征在于，步骤2)所述的乙酰靛酚的固定量为5～10mg/片。

12.权利要求1所述的检测农药残留的速测卡在有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速检测中的应用。