[发明专利]用于治疗HBV的siRNA

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于治疗HBV的siRNA，属基因工程领域。

背景技术

目前，全世界约有4.2亿HBV携带者，HBV感染是严重影响人类健康的疾病之一。慢性HBV感染与肝纤维化、肝癌的发生密切相关。但是，大部分的慢性HBV患者并没有在常规的治疗方式下获得预期的结果。尽管干扰素能够抑制HBV的复制，但是HBV能够通过抑制干扰素的分泌和功能，从而对抗机体的抗病毒机制，而最终导致机体处于免疫耐受状态。比如，在慢性感染的病人的外周血和肝浸润细胞中，调节性T细胞的比例有明显增加。另外，HBsAg，HBeAg以及其他的病毒因子能够直接抑制TLR介导的固有免疫应答。HBV聚合酶能够阻断RIG-I和TLR3介导的IFN-β分泌。

目前，RNAi技术已经广泛应用于抗HBV研究。无论是细胞水平，还是HBV动物模型，siRNA分子均取得明显的抗HBV效果。RNAi干扰药物必将成为今后研究的重点。

能否设计一种分子，既能特异性的沉默HBV相关基因，同时能够诱导IFN的产生，从而能够改善HBV导致的免疫耐受状态。HBx特异的3p-siRNA的出现，使得这样的假想成为可能，为HBV的治疗提供了很好的指导意义。

发明内容

针对上述现有技术，针对HBV治疗现状的不足，本发明提供了一种用于治疗HBV的siRNA。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种用于治疗HBV的siRNA，其序列如SEQ ID NO.1所示：

SEQ ID NO.1：GGUCUUACAUAAGAGGACU。

或：如SEQ ID NO.2所示：

SEQ ID NO.2：GGACGUCCUUUGUUUACGU。

或：如SEQ ID NO.3所示：

SEQ ID NO.3：CCGACCUUGAGGCAUACUU。

本发明的用于治疗HBV的siRNA，是通过以下方法制备得到的：

1.siRNA的设计

(1)首先分析所研究的HBV亚型为ayw型，其序列如SEQ ID NO.4所示。

(2)针对HBV x基因的序列，设计针对HBV x基因的特异性沉默RNA，用siRNA设计软件，设定相关参数包括siRNA的长度为19个碱基序列；GC比例在35-50之间。将潜在的序列利用BLAST进行基因数据库的比较，排除和其他编码序列同源的序列。

(3)化学合成siRNA由广州锐博公司直接合成，其靶点和3p-siRNA相同，序列见表1，以及序列表SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.3。

表1化学合成siRNA序列