[发明专利]一种甲基睾酮分子印迹聚合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种甲基睾酮分子印迹聚合物的制备方法，具体地讲，涉及一种甲基睾酮分子印迹聚合物的沉淀聚合制备方法。

背景技术

甲基睾酮是一种人工合成的代谢类固醇，作为一种促生长剂，上个世纪一直广泛应用于畜牧业与水产中。但是由于甲基睾酮代谢缓慢，蓄积性强，通过食物链进入人体，会产生严重的毒副作用，诸如：肝中毒，胎体中毒、致癌等。欧盟早在1988年就开始禁止使用类固醇激素诸如甲基睾酮来饲养家畜。而在我国，从1999年起也已经法令禁止使用甲基睾酮作为促生长剂。但是到目前为止，仍有少数企业在违规使用。要彻底避免这种情况的发生，除了从源头上控制兽药的生产和使用之外，及时准确地检测和有效富集畜禽产品中兽药残留一直以来都是研究热点。

分子印迹技术(Molecular Imprinting Technology)的迅速发展始于上世纪90年代，用于制备具有高亲和性和选择性的可以识别和结合目标分子的特定受体，即分子印迹聚合物(Molecularly Imprinted Polymers，MIPs)。由于孔穴对模板分子的记忆功能，MIPs对模板分子的亲和力大大增强，表现出分子识别的能力。MIPs依靠形状、大小和化学功能基的分布对模板分子进行识别，类似于生物体系中酶对底物、抗体对抗原、受体对激素的作用，具有专一选择性。而且分子印迹聚合物具有制备简单、成本低廉、使用寿命长等优点，并且比天然的生物分子具有更好的稳定性，更良好的机械性能和高度的交联性。更重要的是，对于那些天然受体不存在或难以得到的目标分子，用这种方法都可以量身定做。到目前为止，有机小分子包括药物分子、杀虫剂、氨基酸、肽、核苷酸碱基、甾族化合物及糖等的印迹已经取得成功；金属和其他离子也可用作模板以使功能基具有特定的排布；而体积较大的分子如蛋白质、细胞等的印迹也已经有报道。可以应用到分子印迹技术中的目标分子非常多，这也是其发展如此迅速的原因之一。分子印迹聚合物以其优越的分子识别性能被广泛应用于分离领域，包括高效液相色谱(HPLC)、固相萃取(SPE)、毛细管电色谱(CEC)以及生物传感器、模拟抗体、模拟酶等方面，其识别过程具有预定性、特异性和实用性这三大特点。与目前常用的固定相相比，具有更强的特异性，能够更有效地识别特定分子。

目前，关于甲基睾酮分子印迹聚合物及其制备方法尚未见有报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种甲基睾酮分子印迹聚合物的制备方法，具有操作简单、重现性好、过程容易控制等优点；所得到的分子印迹聚合物粒径可控且大小均匀；该聚合物对甲基睾酮具有良好的识别能力和选择特性，并且有良好的结合能力和分离能力。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

一种甲基睾酮分子印迹聚合物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将模板分子甲基睾酮与聚合单体以1∶3-1∶8的比例，加入致孔剂中，2-8℃下搅拌0.5-3h；其中，聚合单体可以为甲基丙烯酸(MAA)、丙烯酰胺(AA)或三氟甲基丙烯酸(TFMAA)等；致孔剂可以为乙腈、甲醇或丙酮等中一种或几种的溶液；致孔剂与甲基睾酮的比例约为50-500ml/mmol。

(2)在步骤(1)的产物中加入交联剂和引发剂，热引发聚合，取其沉淀；其中，交联剂可以为乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)或三甲氧基丙烷三甲基丙烯酸酯(TRIM)中的一种或其混合物；引发剂可以为偶氮二异丁腈(AIBN)或偶氮二异庚腈(ABVN)。交联剂与甲基睾酮比例为1∶10-1∶30，引发剂与甲基睾酮比例为40-100mg/mmol。

在热引发聚合前，致孔剂优选分两次加入，即当所述步骤(1)中致孔剂与甲基睾酮的比例为10-100ml/mmol时，步骤(2)中热引发聚合前可再加入致孔剂，使其与甲基睾酮的总比例为50-500ml/mmol。

热引发聚合的温度一般为50-65℃，时间约为16-24h，聚合后，一般经高速离心得到沉淀。

(3)步骤(2)中沉淀经酸性有机溶剂提取去除模板分子后，再用纯有机溶剂提取以去除残留的酸性物质，即得产物。其中，酸性有机溶剂一般选用甲酸、乙酸或三氟乙酸中的一种或几种与甲醇的混合溶液，提取时间一般为12-24h；所述的纯有机溶剂可以为甲醇、乙醇、乙腈或丙酮等中的一种或几种，此处所述纯有机溶剂是指甲醇、乙醇、乙腈或丙酮等本身皆为纯的该物质。